夜合花[Magnolia coco(Lour.)DC.]为木兰科木兰属常绿灌木,本试验的目的是筛选出适合夜合花快速繁殖的组织培养技术,为其工业化生产提供材料及技术支持。
1 试验方法
1.1 外植体选择和处理
取夜合花顶端幼嫩茎段,剪除叶片,用自来水冲洗干净,切成2-3厘米的节段,在超净工作台上用75%酒精处理30秒,再用0.1%升汞灭菌15分钟,然后用无菌水漂洗4-5次,用无菌滤纸吸干表面水分备用
1.2 初代培养
用手术刀将消毒好的枝条切成2厘米左右带腋芽的茎段,接种到初代培养基MS + 6-BA 1.0mg/L + NAA 0.5mg/L上,培养15天左右,芽开始萌动生长,30天左右可长至2-3厘米,牙体健壮。
1.3 继代增殖培养
将初代获得的芽切下,切去生长点,转接到到增殖培养基MS + 6-BA 1.0mg/L + NAA 0.5mg/L上,培养30天左右,增殖系数达3.0。
1.4 生根培养
将苗高为2-3厘米的丛生芽分株切下,接种在生根培养基1/2MS + ABT 0.5mg/L + IBA 0.5mg/L上培养25天,植株长势好,平均根数3.1根,生根率达88%。
1.5 培养条件
以上培养基均含琼脂粉7g/L,蔗糖30g/L(生根培养基为20g/L),pH值6.0,温度25±2℃,光照强度2000lx,12小时/天。
评论