毛水苏(Stachys baicalensis Fisch.ex Benth.)为唇形科水苏属多年生草本植物,本试验的目的是筛选出适合毛水苏快速繁殖的组织培养技术,为湿地植被恢复及毛水苏的开发利用提供材料及技术支持。
1 试验方法
1.1 外植体选择和处理
选取长势粗壮,无病虫害的植株茎段作为外植体。剪去叶片,保留叶柄基部,用软毛刷加洗洁精刷洗1次,然后用自来水流水冲洗1小时,75%乙醇浸泡30秒后用无菌水冲洗3-4次。最后用0.1%升汞溶液加5滴吐温80浸泡5分钟,无菌水冲洗3-4次后备用。
1.2 芽诱导培养
将消毒好的茎段接种到芽诱导培养基WPM中,培养20天左右,从叶腋处长出不定芽,萌芽率高达188%,植株生长健壮,颜色浓绿,未出现玻璃化现象。
1.3 继代增殖培养
将初代获得的腋芽切下,接种到增殖培养基WPM + 6-BA 1.0mg/L + IBA 0.05mg/L + NAA 0.01mg/L中培养20天,增殖系数达2.36。
1.4 生根培养
将增殖培养出的丛生芽切成1厘米左右高的不定芽,接种在生根培养基WPM + NAA 0.3mg/L上培养30天,植株长势好,平均根数4.2根,平均根长3.6厘米,生根率达100%。
1.5 培养条件
以上培养基均含琼脂粉7g/L,蔗糖30g/L(生根培养基为20g/L),pH值6.0,温度25±2℃,光照强度1500lx,12小时/天。
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