铃铛刺(Halimodendron halodendron (Pall.) Voss)是豆科(Fabaceae Lindl.)铃铛刺属(Halimodendron Fisch.ex DC.)植物,为多年生灌木,本研究通过植物组织培养技术建立高效稳定的铃铛刺组织培养技术体系,以期为铃铛刺定向培育、遗传转化等方面的研究提供理论支持,同时为其种质资源及盐碱地区植物保护提供理论依据。
1 试验方法
1.1 外植体选择和处理
挑选种皮完整、籽粒饱满的种子置于烧杯中用蒸馏水浸泡12小时,将浸泡后的种子沥干水分置于超净工作台中。用75%的酒精浸泡秒(期间不停晃动瓶身),再用2%的次氯酸钠溶液浸泡(期间不停晃动瓶身)12分钟,最后用无菌水冲洗5次,置于灭菌滤纸上吸干铃铛刺种子表面的水分,备用。
1.2 种子萌发
将消毒好的种子接种到萌发培养基MS + KT 1.0mg/L + IAA 0.05mg/L中,培养30天左右,萌发率为86.67%,植株涨势好,叶色健康,株高理想。
1.3 继代增殖培养
将初代获得的实生苗的茎剪下,并将茎段切成1厘米左右的小段,接种到增殖培养基MS + 6-BA 0.2mg/L + NAA 0.01mg/L中,几天后部分幼苗基部开始膨胀产生愈伤组织,茎段上部在生长的同时产生丛生芽,增殖系数为2.89。
1.4 生根培养
取出1.5厘米高增殖后的芽转入生根培养基1/2MS + NAA 0.05mg/L + GA3 0.15mg/L中进行诱导生根,培养30天左右,叶色深绿,生长旺盛,根系发达,平均生根率为 92.31%,平均生根数为3.92条/株,平均根长为24.81厘米,平均株高6.33厘米。
1.5 培养条件
以上培养基均含琼脂粉6g/L,蔗糖30g/L,pH值5.8,温度22-25℃,光照强度2000-2500lx,12小时/天。
评论