楝树(Melia azedarach)属楝科楝属落叶乔木,又名苦楝、火捻树、哑巴树等,本研究中主要以黑老虎带芽茎段为外植体,该试验对楝树新品种“美人”的组培快繁技术进行研究,建立一套完善的楝树新品种组培快繁技术体系,以期为实现这一新优品种的规模化、工厂化生产提供理论依据和实践指导,以加快优良品种的繁育及推广。
1 试验方法
1.1 外植体选择和处理
采集当年生、健壮且无病虫害,带叶腋的彩叶楝树新品种‘美人’枝条作为外植体,将枝条上叶片去掉,保留0.5厘米左右的叶柄,剪成1-2厘米茎段,每段保 留1-2个叶腋。先将茎段用75%乙醇擦拭,然后用肥皂搓洗2遍后放入烧杯,自来水下冲洗30分钟。
放进超净台上的三角瓶中,首先用75 %的酒精溶液浸泡30秒,无菌水冲洗4-6次,再用0.2%的升汞浸泡15分钟,最后用无菌水冲洗6-8次,无菌纸吸干表面水分,备用。
1.2 芽诱导培养
将消毒好的茎段切去两端褐化的部分,接种到芽诱导培养基MS中,先暗培养5天,培养20天左右,芽即可萌发,35天左右即可切下转接到增殖培养基。
1.3 继代增殖培养
将初代获得的腋芽切下,接种到增殖培养基MS + 6-BA 0.3mg/L + IBA 0.2mg/L中,培养40天,芽壮,长势快,增殖系数达4.76。
1.4 生根培养
选取增殖培养35-40天生长健壮,高度2厘米以上的无根试管苗转入生根培养基1/2MS + 6-BA 0.1mg/L + NAA 0.05mg/L上,经过30-40天的培养,生根率达90.8%。
1.5 培养条件
以上培养基均含琼脂粉6g/L,蔗糖30g/L,pH值5.5-6.0,温度25±2℃,光照强度2000lx,12小时/天。
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