黑老虎Kadsura coccinea是木兰科Magnoliaceae南五味子属Kadsura的常绿藤本植物，本研究中主要以黑老虎带芽茎段为外植体，研究培养黑老虎无菌苗的适宜条件，旨在为黑老虎的工厂化育苗提供参考依据。
1 试验方法
1.1 外植体选择和处理
将黑老虎大苗移栽到高温室内培养。正常水肥管理3-5个月后，用再次萌发的半木质化带芽茎段作为外植体。
在晴天上午，选取生长健壮的半木质化黑老虎带芽茎段。剪去叶片后，切成3-4厘米长的茎段，每茎段带1个腋芽。将带芽茎段放在三角瓶中用自来水冲洗1-2遍，放入洗洁精冲洗1-2遍，再用流水反复冲洗60分钟，最后用无菌水清洗3-5次，以免茎段分泌的大量黏液影响正常的消毒处理。
放进超净台上的三角瓶中，首先用75 %的酒精溶液浸泡3分钟，无菌水冲洗4-6次，再用0.1%的升汞浸泡45分钟，最后用无菌水冲洗6-8次，无菌纸吸干表面水分，备用。
1.2 启动培养
将消毒好的茎段切去两端褐化的部分，接种到启动培养基1/2MS + 6-BA 2.0mg/L + IAA 0.2mg/L中，先暗培养5天，再转到光照条件下培养25天，腋芽健壮，长势好，丛生芽较多，诱导率达46.2%。
1.3 继代增殖培养
将初代获得的腋芽切下，接种刀增殖培养基MS + 6-BA 3.0mg/L + IBA 0.1mg/L中暗培养2天，再转到光照条件下培养30天，增殖系数达8.5。
1.4 生根培养
本试验对于生根培养基未进行筛选，后续将进一步研究生根培养基配方。
1.5 培养条件
以上培养基均含琼脂粉7g/L，蔗糖30g/L，pH值5.5-6.0，温度25±2℃，光照强度2000-2500lx，12-14小时/天。
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