猫乳(Rhamnellafranguloides (Maxim.) Weberb.)为鼠李科猫乳属叶灌木或小乔木,本试验以猫乳叶片为外植体,研究组培繁育,对于猫乳的推广与应用具有重要的意义。
1 试验方法
1.1 外植体选择和处理
于4-5月选晴朗天气直接在山间取猫乳植株上幼嫩茎段做为外植体,先用自来水冲洗表面浸泡3小时,用洗衣粉水浸泡80分钟,再用自来水冲洗到基本无泡沫,冲洗干净后用剪刀剪去叶片后,放进超净台上的三角瓶中,首先用70 %的酒精溶液浸泡30秒,无菌水冲洗4-6次,再用0.1%的升汞浸泡10-12分钟,最后用无菌水冲洗6-8次每次3-5分钟。
1.2 启动培养
在超净台内切成3-4厘米的带节小段,下部斜切,茎段插入,接种到启动培养基MS + 6-BA 2.0mg/L + NAA 0.1mg/L中,,培养30天茎上腋芽开始长出幼嫩小芽长。
1.3 继代培养
将不污染的带有新营养芽的外植体转入第一继代培养基MS + 6-BA 4.0mg/L + NAA 0.2mg/L中使芽增殖,继代5-7次左右,转入不添加任何激素的空白培养基中继代一次;然后重新继代,每5-7次重新循环;每一块外植体经过5-7次继代后均可一分为二但不超过3次。
1.4 生根培养
将继代培养得到的小芽,转接到生根培养基1/2MS + NAA 0.3mg/L上,培养20天生根,当根生长到3厘米出瓶。
1.5 培养条件
以上培养基均含琼脂粉7g/L,蔗糖30g/L(生根培养基为20g/L),pH值5.5-6.0,温度25±2℃,光照强度1500lx,12小时/天。
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