石仙桃(Pholidota chinensis Lindl.)又名石上莲、石橄榄(广州)、石穿盘(广西)、石萸肉(福建)等,是兰科石仙桃属植物,本文对石仙桃的组织培养离体快繁技术进行了详细研究,完善了石仙桃离体快繁技术体系,为解决目前石仙桃资源短缺问题提供了可行的替代途径。
1 试验方法
1.1 外植体选择和处理
采集的石仙桃健壮。假鳞茎使用自来水清洗干净后先用5%洗衣粉水溶液浸泡3分钟,其间不断地摇动,再用过滤水清洗干净,然后用0.1%升汞溶液在超净工作台上消毒8-10分钟,接着用无菌水冲洗干净,再用消毒过的滤纸吸干表面水分。
1.2 芽诱导培养
消毒后的假鳞茎使用接种刀在操作台上剥去包裹的外层皮,露出新鲜组织,分切成茎段后接种到芽诱导培养基MS + 6-BA 1.0mg/L + IBA 0.5mg/L中,培养2周左右,接种的外植体颜色逐步转绿并有少量侧芽开始萌动。经一个月左右培养后,外植体明显萌芽并增殖生长。
1.3 增殖培养
将生长良好的丛生芽切割成单芽茎段,转接到增殖培养基MS + 6-BA 1.5mg/L + IBA 0.5mg/L上,培养周期为30天,芽苗粗壮,增殖系数达5.5。
1.4 生根培养
选择伸长至2-3厘米的芽苗,转接到生根培养基1/2MS + IBA 1.0mg/L + NAA 0.5mg/L + 1.5%活性炭上培养40天左右,平均根条数4根,生根率达96%。
1.5 培养条件
以上培养基均含卡拉胶5g/L,蔗糖30g/L,香蕉果泥20g/L,pH值5.8-6.0,温度25±2℃,光照强度1500lx,10小时/天。
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