百香果(Passiflora edulis)是西番莲科、西番莲属草质藤本植物,本研究利用组织培养对百香果茎尖进行脱毒研究,旨在为百香果产业可持续健康发展提供优质健康种苗,进而促进百香果产业的发展。
1 试验方法
1.1 外植体选择和处理
在黄金百香果生长旺盛时,以其顶芽或带腋芽茎段为外植体材料,剪取50厘米左右的百香果嫩梢,留腋芽及顶芽,截成2-3厘米的茎段。茎段先用自来水冲洗 2-3次,再用蒸馏水冲洗1次,在无菌环境中用无菌水冲洗两遍,用75%酒精消毒30秒,无菌水洗涤一次,0.1%的升汞浸泡10分钟,无菌水冲洗5次,吸干水分,于解剖镜下剥取茎尖(0.5-1.0毫米)作为外植体,接种于初代培养基中。
1.2 初代培养丛生芽诱导
将处理好的外植体接种到芽诱导培养基MS + 6-BA 2.0mg/L + NAA 0.1mg/L + GA3 0.5mg/L中,培养7天左右,开始萌动,培养35天左右,诱导率达93%。
1.3 增殖培养
待初代培养后得到的无菌外植体茎尖长至5-7厘米时,切段继代培养,每段0.5厘米左右,带一个节间,转接到生根培养基MS + 6-BA 1.5mg/L + NAA 0.1mg/L上培养,茎尖长势快,叶片粗壮,颜色浓绿。
1.4 生根培养
挑选健康、长势好且均匀的组培苗进行生根诱导,长度2-3厘米的增殖芽,将嫩芽从基部切下转接到生根培养基1/2MS + NAA 0.1mg/L + IBA 0.1mg/L上培养25天左右,根粗壮,数目多,生长良好,生根率95%。
1.5 培养条件
以上培养基均含琼脂粉7g/L,蔗糖30g/L,pH值5.8-6.0,温度25±2℃,光照强度2000lx,12小时/天。
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