黄花蒿(Artemisia annua L.)又名青蒿,为一年生菊科(Compositae)蒿属(Artemisia)草本植物,本试验以黄花蒿幼嫩茎尖作为外植体,旨在建立稳定、高效的再生体系,为快速繁殖优良品种的黄花蒿和人工选育提供技术支持。
1 试验方法
1.1 外植体选择和处理
选取生长健壮,无病虫害的黄花蒿的幼嫩茎尖作为外植体,流水冲洗30分钟,用0.3%的链霉素溶液浸泡外植体3小时,75%酒精处理30秒,0.1%升汞溶液浸泡6分钟,无菌水冲洗5次,备用。
1.2 芽诱导培养
将处理好的外植体切成 1.5-2.0厘米左右的茎尖,接种到芽诱导培养基MS + 6-BA 1.0mg/L + NAA 0.1mg/L + 柠檬酸 20mg/L中,培养7天左右,茎段底端出现膨胀现象,继续培养3天后,在茎段底部及伤口处开始形成墨绿色的愈伤组织,诱导率达96.9%,出芽率达93.8%。本试验在使用此培养基配方,可以同时诱导愈伤和出芽,减少转瓶,缩短育苗时间。
1.3 生根培养
取3-5厘米以上生长正常的芽苗,去除基部愈伤组织,转接到生根培养基MS + NAA 0.5mg/L + IAA 0.1mg/L上,培养7天左右,可见乳白色根突起,再过4-5天,不定根数量、根长急剧增加,培养30天左右,生根率达95%。
1.4 培养条件
以上培养基均含琼脂粉8g/L,蔗糖30g/L,活性炭2g/L,pH值5.8-6.0,温度25±2℃,光照强度1500-2000lx,12小时/天。
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