黄芩,中药名。别名山茶根、土金茶根,是唇形科(Scutellaria baicalensis Georgi)黄芩属多年生草本植物,本研究对于保护黄芩的野生植物资源,培育黄芩优良品种并进行克隆化快速繁育,在尽量短的时间内繁育出优良品种种苗,供生产上示范推广具有重要意义和应用价值。
1 试验方法
1.1 外植体选择和处理
取黄芩种子用自来 水漂洗干净后放入75%乙醇中消毒1分钟,转入0.1%氯化汞溶液中消毒10分钟,然后用无菌水冲洗5次,接种在MS基本培养基上无菌萌发,15天后获得无菌苗,在附加6-BA 0.2mg/L的MS培养基上不断继代保存。
1.2 愈伤组织诱导培养
取无菌苗0.5厘米左右的节间,接种到启动培养基MS + 6-BA 2.0mg/L + IAA 0.2mg/L中,进行暗培养几天后,在一部分节的叶腋处便长出腋芽,节间开始膨大,约10天后,节间的两端和一部分节的叶腋处可见肉色的愈伤组织,以后愈伤组织逐渐增大,诱导率100%。
1.3 愈伤组织分化培养
将暗培养中的黄芩愈伤组织切成0.3厘米见方的小块,转入分化培养基MS + 6-BA 0.1mg/L + PP333 0.5mg/L后,4-5天愈伤组织开始转绿,然后表面出现绿色的芽点,继续培养便陆续形成小植株。
1.4 生根培养
将试管苗切成1-2个节的小段,接种在生根培养基1/2MS + NAA 0.1mg/L + PP333 0.5mg/L上,生根率80%以上,根粗苗壮。
1.5 培养条件
以上培养基均含琼脂7g/L,蔗糖30g/L(生根培养基为20g/L),pH值5.8,温度25±1℃,光照强度1200lx,16小时/天,愈伤组织培养阶段为暗培养。
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