菩提树(Ficus religiosa L.),为桑科榕属植物,本文以菩提树的带芽茎段为外植体,研究了菩提树组织培养体系,旨在为菩提树的组培快繁生产和新品种培育等提供技术参考。
1 试验方法
1.1 外植体选择和处理
筛选的优良植株无病虫害植株的嫩枝,剪成1.5-2.0厘米带腋芽茎段,置于烧杯中加入洗衣粉,以流水冲洗干净,使用75%的乙醇浸润30秒,之后用无菌水漂洗2-3次,再置于0.1%的升汞溶液中浸泡10分钟,之后用无菌水冲洗3-5次,除去表面水分,备用。
1.2 启动培养
将消毒茎段切去两端伤口,接种到启动培养基MS + 6-BA 1.0mg/L + NAA 0.1mg/L中,培养8-9天后,腋芽开始萌动,逐渐出现生长点,12天后便长出幼芽,25 天后,侧芽长至2-3厘米,诱导率达80%。
1.3 增殖培养
将初代培养诱导分化的侧芽切成1.5-2.0厘米左右的茎段,接种到增殖培养基MS + 6-BA 1.5mg/L + NAA 0.3mg/L上,增殖倍数最高达4.5,且芽生长较健壮。
1.4 生根培养
将生长旺盛、生长势均一的试管苗从基部切下2-3厘米的带顶芽茎段,接种到生根培养基1/2MS + NAA 0.5mg/L上,接种6天后,幼苗生长状况良好;继续培养至25天,可见苗有生根迹象,有少数根生长出来;45天后,大量根已经生长出来。
1.5 培养条件
以上培养基均含蔗糖30g/L,琼脂粉7g/L,pH值5.8,温度25±2℃,光照强度2000-3000lx,12小时/天。
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