小丽花(Dahlia pinnata cv.)是菊科多年生球根花卉,本试验研究小丽花的组培快繁技术,以期满足小丽花工厂化生产种苗的需求。
1 试验方法
1.1 外植体选择和处理
筛选的优良植株无病虫害植株的嫩茎,使用75%的乙醇浸润30秒,之后用无菌水漂洗2-3次,再置于0.1%的升汞溶液中浸泡5-7分钟,之后用无菌水冲洗3-5次,除去表面水分,备用。
1.2 启动培养
将消毒茎段切成1.5-2.0厘米长,每段带一腋芽,接种到启动培养基MS + 6-BA 2.0mg/L + NAA 0.05mg/L中,培养10天后,诱导率达90%。
1.3 增殖培养
将腋芽诱导而来的无菌苗接种到增殖培养基MS + 6-BA 1.0mg/L + NAA 0.05mg/L上,接种7天后基部先是略有膨大,呈黄绿色,随后形成团块状愈伤组织,2周,开始从基部和腋芽处分化出新芽,培养2个月左右,增殖系数5-7。
1.4 生根培养
将2-5厘米健壮小芽从基部切下,接种到生根培养基1/2MS + IBA 1.0mg/L + NAA 1.0mg/L上,培养25-30天后,有不定根产生,从而形成完整的植株,其生根率达100%。
1.5 培养条件
以上培养基均含蔗糖30g/L(生根培养基为20g/L),琼脂粉7g/L,pH值5.8,温度23±2℃,光照强度2000-3000lx,12小时/天。
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