蓝雪花(Ceratostigma plumbaginoides)别称山灰柴、假靛(河南),角柱花等,多年多年生直立草本,为白花丹科、蓝雪花属植物,蓝雪花播种繁殖,其种子自然结实率低,不易获得种子,而利用扦插繁殖的生根率较低,不易获得大量种苗,本研究利用组培技术,为其快繁提供技术参考。
1 试验方法
1.1 外植体选择和处理
选取生长健壮的蓝雪花植株,捡取枝条的上半部分,将该上半部分枝条处理为3-5厘米的小段,每个小段上保留1-2个叶芽,使用75%的乙醇浸润该小段,之后用无菌水漂洗2-3次,再置于0.2%的纳米活性炭水溶液中浸泡8-10min,之后用无菌水冲洗3-5次,除去表面水分得到蓝雪花外植体。
1.2 芽分化培养
将处理好的外植体接种于分化培养基 A + 6-BA 0.3 mg/L + NAA 0.3 mg/L + 椰汁 3%中,培养35天左右,侧芽处分化出丛生芽。
1.3 壮苗培养
选取生长状况良好的丛生芽,切成单芽转接到壮苗培养基A + 6-BA 0.8mg/L + IAA 0.6mg/L + 椰汁 5%上,培养35-45天左右,获得健壮植株。
1.4 生根培养
将经壮苗培养后的植株转接到生根培养基A + NAA 1.0mg/L + 椰汁 5% + 甘草提取物 0.2mg/L + N-甲基牛磺酸 2.0mg/L上,培养40天左右,芽分化率68%。
1.5 培养条件
A培养基配方为香蕉发酵物30g/L、土豆泥20g/L、蛋白胨3g/L、胰蛋白酶2g/L和酵母膏5g/L,香蕉发酵物为将香蕉置于25℃的无氧条件下发酵3天得到的物质。以上培养基均琼脂粉5g/L,pH值5.8,温度25±1℃,光照强度2000lx,12小时/天。
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