玉兔兰(Cymbidium Jade Hare)是采用墨兰和兔耳兰杂交培育的兰花集体杂种,具有很高的观赏价值和广阔的市场前景,本试验研究玉兔兰的组培快繁特性,为提高玉兔兰组培快繁特性提供理论指导。
1 试验方法
1.1 外植体选择和处理
选取玉兔兰2-4厘米健壮饱满侧芽各15个,用锋利刀片从母株的基部切取芽,用洗洁精浸泡洗涤后,再用流水冲洗干净,剥去外层苞片。在超净工作台上用75% 酒精浸没消毒30秒,无菌水洗3次,之后用0.1%的升汞溶液浸没消毒8分钟,无菌水洗3次,剥去外层苞叶,再用0.1%的升汞溶液浸没消毒5分钟,最后无菌水洗5次。用无菌滤纸吸干表面水分,备用。
1.2 根状茎诱导
将已经消毒的材料置于无菌报纸上,分离并切取1-3毫米茎尖,接种于诱导培养基 MS + 6-BA 2.0 mg/L + NAA 0.5 mg/L + AC 0.5g/L + 椰汁 10%中,暗培养20天后,再置于光照环境下进行培养60天。
1.3 根状茎增殖
选取生长状况良好,颜色一致的根状茎转接到增殖培养基MS + 6-BA 1.0mg/L + NAA 0.5mg/L + AC 0.5g/L上,培养50天,增殖系数2.2左右。
1.4 根状茎分化培养
选取生长状况良好,颜色一致的根状茎转接到分化培养基MS + 6-BA 1.5mg/L + NAA 0.3mg/L + AC 0.05g/L上,培养40天左右,芽分化率68%。
1.5 生根培养
选取4厘米高的幼苗,转接到生根培养基MS + 6-BA 0.1mg/L + NAA 0.5mg/L + AC 0.5g/L上,培养50天左右,长势好,生根率高。
1.6 培养条件
以上培养基均添加蔗糖30g/L(生根培养基20g/L),7g/L卡拉胶,pH值5.8,温度26±1℃,光照强度2000lx,12小时/天。
评论