黑果枸杞组培快繁技术实例含配方

黑果枸杞（Lycium ruthenicum Murr）为茄科枸杞属多年生小灌木,本试验用组织培养技术培育黑果枸杞试管苗，为其工厂化育苗提供技术参考。

1 试验方法

1.1 外植体选择和处理

采集发育正常的、无病害的、饱满的黑果枸杞果实，阴干后，用无菌水浸泡，去除果皮及种子外附着的紫黑色素，自然风干后得到种子，挑选大小一致饱满的种子，低温春化24小时，在70%酒精中浸泡30秒，1.5%次氯酸钠溶液中浸泡3分钟，无菌水冲洗3次，用灭菌滤纸吸干表面水分，备用。

1.2 种子萌发

将处理后的种子接种到1/2MS + 蔗糖 5g/L培养基中,经过约15-20天的培养，生长出第一对真叶，萌发率为93.5%。种子萌发后，将植株转接到MS + 蔗糖 10g/L的培养基上继续培养。

1.3 愈伤组织诱导

当第一对真叶长至2-3厘米时，将其剪切成1厘米小段，转接到愈伤组织诱导培养基MS + 6-BA 0.5mg/L + 2,4-D 0.1mg/L + 蔗糖 10g/L上，10天后叶片变黄，逐渐脱分化形成愈伤组织，15天左右，诱导率达88%。

1.4 芽分化增殖培养

将长势优良的愈伤组织接种到芽分化培养基MS + 6-BA 0.2mg/L + 蔗糖 10g/L上，培养35-45天左右，愈伤组织逐渐分化成丛生芽，将不定芽切成0.5厘米的单茎芽继续转接到该培养基上进行增殖培养，可以获得大量的丛生芽，增殖系数为5.05。

1.5 生根培养

将长势优良的不定芽剪切成1.5-2厘米，转接到生根培养基MS + IBA 0.1mg/L + 蔗糖 5g/L上，培养15-25天左右，不定芽长高，开始生长出明显根系，培养35天左右，根长约５-６厘米时可以出瓶移栽。

1.6 培养条件

以上培养基均添加7g/L琼脂，pH值5.8，温度25±1℃，光照强度3000lx（生根阶段为2000lx），14小时/天。