金莲花(Trollius chinensis)为毛茛科多年生植物,本研究旨在建立金莲花组织培养和快速繁殖体系,解决目前实生播种成苗率低的难题,为金莲花规模化生产和园林应用提供优质种苗。
1 试验方法
1.1 外植体选择和处理
以野生金莲花种子为初始材料,获得金莲花无菌苗,然后以无菌苗根茎为外植体。
将获得的种子用自来水冲洗20分钟,清洗干净后,用温热水浸泡5分钟,在用75%酒精迅速漂洗一下,最后用0.1%的升汞溶液浸泡10-15分钟,无菌水冲洗3-5次,
1.2 初代培养
将上述处理后的鳞片小块接种到诱导培养基MS + 6-BA 1.0mg/L + NAA 0.2mg/L上,8天后,鳞茎块出现膨大现象;10天之后在切口处出现了浅黄绿色的小突起;20天后,鳞茎块上明显长出了小鳞茎或细小的绿叶片。
1.3 继代增殖培养
将诱导3周分化出的长约2厘米左右的健壮试管苗或小鳞茎,转接到继代增殖培养基MS + 6-BA 1.0mg/L + NAA 0.05mg/L上培养,培养2个月左右,增殖系数可达2.6。
1.4 生根培养
将继代培养的健壮无根试管幼苗转入生根培养基MS + IBA 0.5mg/L + NAA 0.1mg/L中,12天后,有白色细根长出,45天后,生根率达86.7%,根粗且侧根多。
1.5 培养条件
以上培养基均附加30g/L蔗糖,7g/L琼脂,pH值5.8。培养温度为25±2℃,光培养时光照度为2000lx,光照11小时/天。
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