铁皮石斛（Dendrobium officinale Kimura et Migo），属微子目，兰科多年生附生草本植物。本试验在前人研究的基础上，以铁皮石斛的未成熟种子为外植体材料，研究了铁皮石斛组培快繁技术，以期为铁皮石斛的工厂化育苗提供技术支撑。
1 试验方法
1.1 外植体选择和处理
选取八成熟的铁皮石斛蒴果，用自来水冲洗干净，再置于洗洁精溶液中摇洗3次，每次摇洗5分钟；取出蒴果用自来水洗净，沥干水后，在超净工作台上先用75%浓度的酒精消毒3分钟；倒去酒精，再用0.15%的升汞消毒15分钟；倒去升汞消毒液，用无菌水冲洗4-5次，沥干备用。
1.2 初代培养
将经过表面消毒的蒴果放在无菌的不锈钢盘上，切除头尾约0.5厘米部分并弃去，然后将蒴果中段沿纵轴切开，取出种子，均匀地接种到培养基改良KC大量元素 + MS微量元素 + 肌醇100mg/L+ VB3 0.5mg/L + VB1 1.0mg/L + VB6 0.5 mg/L + 甘氨酸2.0mg/L + 椰子水 20%+6-BA 0.1mg/L + 蔗糖 2% + 琼脂 0.7%上，培养约15天后，用肉眼可观察到在培养基表面有浅绿色的小团粒(直径0.5-1.5毫米)。这些浅绿色颗粒系原球茎体，或为少数原球茎体已萌发出子叶和第1片真叶而形成的无菌实生小苗。
再经过20-25天的培养，大部分原球茎体已萌发，形成了具1-2片真叶的幼苗，同时也产生了一些新增殖的原球茎体。
1.3 继代增殖培养
将初代获得的原球茎切割，转接到增殖培养基1/2MS无机盐 + 肌醇100mg/L + VB3 0.5mg/L +VB1 1.0mg/L + VB6 0.5mg/L + 甘氨酸 2.0mg/L + 蔗糖2.5% + 琼脂 0.8% + AC 0.1% + 椰子水 10% + NAA 0.1mg/L中进行继代增殖培养，增殖系数高达145.28。
1.4 壮苗培养
铁皮石斛未成熟种子经初代培养基培养后直接获得的无菌实生小苗，或者从原球茎体增殖培养过程中获得的新增殖形成的原球茎体经萌发后形成的组培小苗，由于个体太小，不宜将其直接转接到生根培养基上培养。应该经过一个壮苗培养阶段，使小苗进一步发育成长，形成比较健壮的植株之后，才可转入生根培养。壮苗培养基用1/2MS + IBA 0.75mg/L。
1.4 生根培养
将经壮苗培养后的组培苗转入生根培养基1/2MS + 香蕉泥 10% + NAA 1.0mg/L中培养，经过60天生根培养，可以获得理想的发根植株，植株高度可达4-5厘米，每片叶长1.2-1.5厘米，最长者可达2.5厘米，叶片最宽处为0.3-0.5厘米。
1.5 培养条件
pH值5.8，温度25±2℃，光照强度2000-2500lx，10小时/天。
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