贴梗海棠(Chaenomeles speciosa(sweet)Nakai)别名木梨,铁角梨,皱皮木瓜,蔷薇科木瓜属,落叶灌木,为了突破繁殖材料数量上的限制,本试验对贴梗海棠组织培养快繁技术进行研究,以期为该品种的开发推广奠定了技术基础。
1 试验方法
1.1 外植体选择和处理
选取在室内培养2-3个月的贴梗海棠,剪取嫩枝条作为外植体,将外植体减掉叶片,用清水冲洗2-3小时,将其切成5-7厘米的茎段,再用蒸馏水冲洗2-3次后转至无菌室。在超净工作台上将切好的茎段用70%乙醇浸泡30秒,无菌水冲洗3次,然后用0.1%升汞浸泡6-8分钟,再用无菌水冲洗5次以上,无菌滤纸吸干水分后,切成1-2厘米的单芽茎段备用。
1.2 初代培养
将处理好的外植体接种在芽诱导培养基MS + 6-BA 1.0mg/L + NAA 0.2mg/L上,培养10天后芽开始萌发,20天左右,茎尖变绿,伸长生长,30天后芽可长至3-4厘米高,同时,基部长出许多小不定芽,形成芽丛。
1.3 继代增殖培养
将初代获得的不定芽切割,转接到增殖培养基MS + 6-BA 0.5mg/L + NAA 0.5mg/L中进行继代增殖培养,增殖率达7.2,芽高度适中,健壮。
1.4 生根培养
在生根前,将继代增殖培养生成的丛生芽进行切割,保留基部1.5厘米切断,可先在MS培养基中培养20天后,再转入生根培养基1/2MS + IBA 0.3mg/L + NAA 0.2mg/L中培养,15天左右,茎段基部产生根原基,30天后长出4-5根白色嫩根,根粗壮,苗长势好。
1.5 培养条件
以上培养基均添加3%蔗糖和0.7%琼脂粉,pH值5.8,温度25±2℃,光照强度2000lx,12小时/天。
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