金手指香蕉组培快繁技术实例含配方

康倍斯
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2022年7月2日11:26:39 评论 442

金手指香蕉组培快繁技术实例

金手指(Goldenfinger)香蕉又称皇帝蕉、帝王蕉、贡蕉、甜蕉、米香蕉、金香蕉等,金手指香蕉常规繁殖采用吸芽,不但繁殖数量有限,而且母株在大田栽培时易受镰刀菌(巴拿马)枯萎病的危害,由带病母株发出的吸芽大多也会受到该病菌的感染,影响生长和结实。采用吸芽生长点组织培养能获得大量无病菌的试管苗。本试验对金手指香蕉的组织培养进行了研究,以期为金手指香蕉苗工厂化生产提供技术支持。

1 试验方法

1.1 外植体选择和处理

在生长季节选取生长健壮、无病害植株的40-50厘米高的吸芽为外植体,用自来水冲洗表面的泥土后,切除上部的外假茎,留下6厘米高的茎和下部外假茎。在无菌条件下逐层剥去包在茎外的叶鞘,每剥一层用70%酒精擦一次,当外植体为2X2X2厘米大小时,浸泡在70%酒精中15秒,再用0.1%升汞溶液消毒两次,每次5分钟,每次无菌水冲洗4-5次,切去基部变褐部分,将长约2厘米左右的外植体纵切一分为二接种到腋芽启动培养基中进行腋芽诱导;同时,为保证获得无病毒的试管苗,可再将外植体剥至长约0.5厘米左右生长点,再接种到腋芽启动培养基上。

1.2 初代培养

将处理好的外植体接种在腋芽启动培养基MS + 6-BA 6.0mg/L + IBA 0.5mg/L上,吸芽一分为二纵切后,顶芽被破坏不能生长,不定芽生长启动快,25天左右茎节处有不定芽生成。采用体积小的生长点外植体时,10天进行顶芽启动生长,但很少有不定芽长出,需继代1-2次,50-60天时才形成不定芽。

1.3 继代增殖培养

刚开始可以将初代获得的不定芽或腋芽切割,转接到增殖培养基MS + 6-BA 6.0mg/L + IBA 0.5mg/L中进行继代增殖培养,4-5代后获得足够的不定芽后,采用MS + 6-BA 4.0mg/L + IBA 0.2mg/L作为继代培养基,以同时兼顾增殖率和芽的质量。

1.4 生根培养

在生根前,可采用MS + 6-BA 2.0mg/L + IBA 0.1mg/L进行壮苗培养。当丛生芽长至2-3厘米长时,切成单芽后转入生根培养基MS + IBA 1.0mg/L + NAA 0.2mg/L中培养,7天左右100%生根,生长快。

1.5 培养条件

以上培养基均添加3%蔗糖和0.67%琼脂粉,pH值5.5-5.8,温度28±2℃,光照强度1500-2000lx,12小时/天。

注意:当腋芽长出时,可将其切下在丛生芽增殖培养基上进行丛生芽增殖。当增殖到3-4代,每个外植体有20-30个芽时取1-2个进行枯萎病的病原菌免疫学检测,检测无病菌的株系再进行大规模增殖,继代到10-12代时进行壮苗和生根培养。

康倍斯
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