藏红花(crocus sativusl)又名 番红花、西红花、鸢尾科,番红花属球根类多年生草本植物,我国藏红花栽培生产主要是靠球茎繁殖,而在栽培过程中球茎越种越小,小球茎开花少且花小,甚至不开花,从而失去药用价值。为此,我们通过组织培养选择适宜球茎作为外植体及丛生芽诱导,为大量培育优良藏红花提供种源,建立高效稳定的藏红花快繁体系提供参考。
1 试验方法
1.1 外植体选择和处理
选取直径大于3.2厘米以上的大球茎,用自来水冲洗干净,再加少量洗衣粉溶用柔软毛刷轻轻涮洗表面,然后用自来水冲洗干净;再在超净工作台内用75%酒精灭菌60秒,用无菌水冲洗1-2次,再用0.1%氯化汞浸泡12-15分钟,无菌水冲洗3-4次,备用。
1.2 初代培养
将球茎切成0.3-0.5厘米的小块,接种在诱导培养基MS + 6-BA 1.0mg/L + NAA 0.3mg/L上,培养10天后,出芽快,长势好,出芽率达92%。
1.3 继代增殖培养
把初代培养得到的丛生芽条切成单芽,转接到增殖培养基MS + 6-BA 3.5mg/L + NAA 1.0mg/L,培养25-30天一个继代周期,芽苗绿,丛生芽分化好,增殖系数达4.32。
1.4 生根培养
将芽丛切割成单芽转接到生根培养基1/2MS + IBA 0.3mg/L上,诱导生根15天左右,生根率达90%。
1.5 培养条件
以上培养基均添加3%蔗糖和0.6%琼脂粉,pH值5.8,温度20±2℃,光照强度1000-1500lx,10小时/天。
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