木枣(Ziziphus jujuba var.Muzao)是枣属植物,本文将木枣组培快繁技术和方法介绍如下。
1 试验方法
1.1 外植体选择和处理
于3-4月份取健壮枣树上1-2年生枣头,用0.05%-0.1%洗洁精液轻轻刷洗硬枝表 面污垢后,置自来水下反复冲洗干净,修剪成20cm左右的枝段,将每20枝捆一小捆,置于(55士1)℃恒温水浴锅内热浴处理1小时(以除脱植株病毒);然后放于培养室内进行水培发芽,每天换温水1-2次,待水培芽长至5厘米左右时,即可剪下作为外植体。
取水培芽,剪掉大叶片,于0.05%-0.1%洗洁精液中清洗,用自来水反复漂洗后,再用蒸馏水冲洗3次;在超净工作台上,将外植体用75%乙醇溶液浸泡15秒,再用0.1% 升汞(加2-3滴吐温-20) 液消毒10分钟, 然后用无菌水冲洗5-6次, 并将其切成1厘米左右带1个腋芽或顶芽的茎段,待接种。
1.2 初代培养
将上述外植体接种到培养基CyI + 6-BA 1.0mg/L + NAA 0.2mg/L上,经过7-10天的培养,腋芽开始萌动,30天时,芽便长成2-5厘米的嫩梢。
1.3 继代增殖培养
将初代培养获得的无菌苗,在无菌条件下切成1厘米左右带1个腋芽的茎段、茎尖或带有丛生芽点的基部茎段,转接到继代增殖培养基CyI + 6-BA 1.5mg/L + IBA 0.3mg/L上培养,7天左右不定芽开始萌动,10天后迅速生长,30天时生长达最高峰,以后生长趋缓。培养30天时,每段平均分化出3.6个不定芽,平均苗高 4.2厘米,此时经切割可再次继代。每次继代培养周期为30天,时间过长会出现黄叶、老化现象。在继代培养初期,6-BA/IBA浓度比可保持在1.5/0.3,经3-5代培养驯化后,可降至1.2/0.3。
1.4 生根培养
当继代培养的试管苗长至3厘米以上时,将其切下移至生根培养基改良H(维生素B1为1.0mg/L) + IBA 0.4mg/L + IAA 0.2mg/L琼脂上,经7天的培养,根开始分化;20天时生根率达100%,平均根数4.5条,根长大于1厘米,当根长大于5厘米时即可炼苗移栽。
1.5 培养条件
以上培养基均附加30g/L蔗糖(生根培养基为20g/L),6g/L琼脂,pH值6.0。培养温度为27±3℃,光培养时光照度为2000lx,光照12小时/天。
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