牡丹(Paeonia suffruticosa) 是毛莨科芍药属落叶灌木,牡丹传统的繁殖方式有种子繁殖、分株繁殖、压条繁殖、嫁接繁殖等,但牡丹种子具有休眠习性,且生根萌发率极低,无性繁殖速度慢,限制了牡丹苗木的产业化生产。本研究利用组培快繁技术为牡丹工厂化繁殖提供技术参考。
1 试验方法
1.1 外植体选择和处理
采用顶芽、腋芽为外植体,在12月份至次年2月份取材,先用自来水将外植体表面冲洗干净,或者再用适量洗洁精和84消毒液浸泡20分钟,用毛刷轻轻洗净鳞片包裹的尘土,用自来水冲洗10分钟。在无菌条件下,先用75%酒精消毒30秒,再用0.1%升汞溶液浸泡消毒8-10分钟,无菌水冲洗6次,剥去芽外部的芽鳞和鳞片,切取5毫米长的茎尖,待接种。
1.2 初代培养
将上述处理后的茎尖接种到诱导培养基MS + 6-BA 1.0mg/L + GA3 0.5mg/L上,茎尖在诱导培养基上经20天左右便可萌发产生不定芽。
1.3 继代增殖培养
当芽长至1厘米左右即可切下转接到继代增殖培养基MS + 6-BA 1.0mg/L + GA3 0.5mg/L上培养,小芽可继续长大并形成丛生芽。
1.4 生根培养
当丛生芽长至2厘米左右时,可将其切分成单株转入生根培养基1/2MS + IBA 1.0mg/L + GA3 0.5mg/L中,培养20天左右即可形成带根系的再生植株。
1.5 培养条件
以上培养基均附加30g/L蔗糖,7g/L琼脂,pH值5.8。培养温度为25±2℃,光培养时光照度为2000lx,光照10小时/天。
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