栝楼(Trichosan thes kirilowii Maxim)亦称瓜蒌、 吊瓜、柿瓜、野葫芦、药瓜、杜瓜,雌雄异株,是葫芦科 栝楼属的一种多年生缠绕性藤本植物,利用植物组织培养技术,建立栝楼优良品种离体快繁体系,能在短期内培育出大量基 因遗传稳定、经济性状表现一致的优质种苗,从而迅速实现栝楼优良品种的大面积推广利用。本实验用栝楼含腋芽的茎段为材料对栝楼的愈伤组织诱导和快速繁殖进行了初步探讨。
1 试验方法
1.1 外植体选择和处理
取栝楼茎顶用2%洗衣粉洗去灰尘后,在流水下冲洗2小时,再用70%酒精消毒液浸30秒,无菌水冲洗3-4次,然后用,01%的升汞液消毒6-8分钟,无菌水冲洗3-4次用无菌纸吸干水分。
1.2 芽诱导培养
将上述处理后的外植体切取含腋芽的茎段接种到诱导培养基MS + 6-BA 1.5mg/L上,3天后茎段上开始产生愈伤组织,同时腋芽开始萌动,7天后,芽高约0.5厘米,此后芽的生长很快,至15天时芽高已达2-3厘米,培养30天,平均苗高达3.5厘米。
1.3 继代增殖培养
将诱导出的无菌苗切成0.5-0.8厘米长的茎段,转接到继代增殖培养基1/2MS + ZT 0.5mg/L上培养,苗高,茎节数稳定,繁殖系数高,茎秆健壮,茎节腋芽肥大。
1.4 生根培养
在增殖培养基上培养20天左右,大部分芽苗即可长至3厘米左右,具有4-5个节,此时将丛苗上部切下2厘米左右转入生根培养基MS + IBA 0.5mg/L中,苗的下部转入增殖培养基中继续培养,生根培养14天左右,可长出4-5条根,根粗壮,生根快,根毛多,生根率100%。
1.5 培养条件
以上培养基均附加30g/L蔗糖,7g/L琼脂,pH值5.8。培养温度为25±2℃,光培养时光照度为2500lx,光照14小时/天。
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