朱顶红(Amaryllis vittata) 又名孤挺花、百枝莲、喇叭花,为石蒜科朱顶红属多年生草本植物,一般通过分球繁殖,但繁殖效率很低,无法满足生产与市场的需要,而且长期的无性繁殖容易积累和传播病毒。因此,通过组培快繁技术是规模化生产朱顶红以满足市场需求的主要途径。
1 试验材料
供试材料为2-3年生、已开花的朱顶红鳞茎所附生的小鳞茎。
2 试验方法
2.1 外植体选择和处理
将小鳞茎在阳光下晾晒2-3小时以控干表面的水分,然后剥除外层干枯的鳞片,切除根部,冲洗干净。在超净工作台,用70%的酒精浸泡30秒,再用0.1%的升汞(加2-3滴吐温-80)消毒8分钟,用无菌水冲洗 4 次后,用无菌滤纸吸干残余的水分。然后,切除消毒过的鳞茎上端鳞片,留下直径1.5厘米左右、基部1厘米左右的鳞片及鳞茎盘。在无菌条件下,将鳞茎盘4分切后,待接种。
2.2 鳞茎诱导培养
将上述处理后的外植体接种到愈伤组织诱导培养基MS + 6-BA 2mg/L + NAA 0.1mg/L上,接种1周后,鳞茎盘开始膨大,鳞片伸长并向外开张,接种后15天左右在2鳞片之间出现小球状体,长势好,叶色亮绿,诱导率达64.3%。
2.3 继代增殖培养
将小鳞茎的鳞茎盘下半部分切成2块转接到继代增殖培养基MS + 6-BA 2.0mg/L + NAA 0.2mg/L上,3天后鳞片便开始萌动,10天左右露白,20天左右可以形成直径为0.5厘米的小鳞茎,多数的外植体最内层鳞片由四周向中心愈合生长,形成一个新的小鳞茎,增殖系数最大,且小鳞茎生长良好,叶片颜色亮绿。
2.4 生根培养
将单个小鳞茎接种在生根培养基1/2MS + IBA 0.5mg/L + NAA 0.5mg/L上培养,20天左右小鳞茎增粗长壮成为球状的鳞茎,上部叶片开始伸长并转绿,底部产生白色的根。
2.5 培养条件
以上培养基均附加30g/L蔗糖(生根培养基为20g/L),6g/L琼脂,pH值5.8。培养温度为27±1℃,光照度为2000lx,光照12小时/天。
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