大花萱草(Hemetocallis fulva Var∙flore-pleno)也称多倍体萱草,系百合科萱草属多年生草本宿根花卉,其繁殖以分株为主,但年增殖率仅1-2倍。采用组织培养繁殖不仅可提高繁殖倍数,而且可以 打破季节局限,加快繁殖速度,实现工厂化育苗。
1 试验材料
以花蕾下部的花茎作为外植体。
2 试验方法
2.1 外植体选择和处理
将花茎用洗衣粉水洗净,再用自来水冲洗干净,在无菌条件下,用0.1%的升汞消毒10分钟,再用无菌水冲洗4-5次,将花茎切成约5毫米大,备用接种。
2.2 愈伤组织诱导及芽分化
将上述处理后的花茎接种到愈伤组织诱导培养基MS + 6-BA 2.0mg/L + NAA 0.2mg/L上,培养45天可形成浅黄色愈伤组织,再将愈伤组织转接至相同培养基培养基继续培养30天,即可分化出芽,继续培养10-20天芽分化有所提高。
2.3 继代增殖培养
将初代培养获得的芽与愈伤组织一起分割接种到继代培养基MS + 6-BA 1.0mg/L + KT 1.0mg/L + IBA 0.5mg/L上培养;每月可继代一次。
2.4 生根培养
将继代苗转接到生根培养基1/2MS + IBA 0.3mg/L上,培养20天左右,生根率100%,一般1-2根,粗壮,白色,待根长至2厘米左右即可移栽。
2.5 培养条件
以上培养基均附加20g/L蔗糖,6.5g/L琼脂,pH值5.8。培养温度为25℃,光照度为2000lx,光照16小时/天。
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