人参果(Solanum muricatum Ait.)是茄科茄属多年生草本植物,通常以播种和茎段扦插繁殖,但引入之初,数量有限,用组织培养法可以大大加快繁殖速度,为该品种的推广提供了一条有效途径。
1 试验材料
以人参果带芽茎段作为外植体。
2 试验方法
2.1 外植体消毒
切取3厘米带顶芽或侧芽的茎段用流水冲洗60分钟,然后用75%酒精浸15秒,接着用0.1%升汞溶液消毒7分钟,最后用无菌水冲洗4-5次,滤纸吸去水分,茎段切成0.5厘米带侧芽的小段,备用。
2.2 愈伤组织诱导培养
将上述处理后的外植体接种到诱导培养基MS + 6-BA 2.0mg/L + KT 2.0mg/L上,培养20天后,即可诱导出组织紧密,颜色绿色的愈伤组织,培养50天左右,即可产生丛生芽。
2.3 继代增殖培养
将诱导阶段获得的较长的试管苗切成1厘米左右茎段,其余切割成0.5x0.5厘米左右小块,继续转接到培养基MS + 6-BA 2.0mg/L + KT 2.0mg/L中进行继代增殖培养,培养周期以20-25天为宜,繁殖系数一般为3-5。
2.4 生根培养
选择2-3厘米高的继代苗转接到生根培养基1/2MS + IBA 0.1mg/L上,生根率可达98%以上,根白且粗壮,根数多。
2.5 培养条件
以上培养基均附加30g/L(生根培养基为20g/L)蔗糖,8.5g/L琼脂,pH值5.8-6.0。培养温度为20-25℃,光照度为2000lx,光照14小时/天。
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