火棘(P.f ortuneana)为蔷薇科苹果亚科火棘属,现以火棘的茎尖为材料对其在组织培养方面进行研究。
1 试验材料
取生长旺盛的火棘植株,剪取植株上部的茎尖部位并带有1-2个侧芽,茎段长度为1-2厘米。
2 试验方法
2.1 外植体消毒
将外茎植段体上的的消叶毒片剪去,用洗衣粉和多菌灵(少量)加适量清水搅动洗涤5-10分钟后,用自来水冲洗干净,拿到超净工作台上先用70%酒精浸泡30-40,秒,再用0.1%升汞消毒10-15分钟,最后用无菌水冲洗3-4次,然后接种。
2.2 初代启动培养
将上述处理后的外植体接种到启动培养基MS + 6-BA 1.0mg/L上,培养30天后,萌发的茎尖和侧芽及成苗好,萌芽率和成苗率均达100%,苗高平均达3.9厘米,茎节数平均达4.7个,叶片大、叶色浓绿。
2.3 继代增殖培养
将获得的无菌苗切段带单芽,继续转接到培养基MS + 6-BA 1.0mg/L中进行继代增殖培养,培养周期以30天为宜,苗高、茎节数稳定,茎杆健壮、茎节腋芽明显,增殖系数高。
2.4 生根培养
将增殖苗切段转接到生根培养基1/2MS + NAA 0.2mg/L上,培养15天后,生根率可达90%以上,根粗壮,植株生长旺盛。
2.5 培养条件
以上培养基均附加30g/L蔗糖,7g/L琼脂,pH值5.8-6.0。培养温度为23-27℃,光照度为2000lx,光照14小时/天。
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