金柑(Fortunella margaria Swingle) 属芸香科金橘属,为常绿观赏果树,目前金柑的繁殖方式主要采用嫁接等方法,生产季节性强,技术要求高,限制了优良新品种的迅速推广,而用组织培养的方法可为金柑良种的快繁提供新的途径。
1 试验材料
以金柑种子上胚轴为实验材料。
2 试验方法
2.1 外植体消毒
选取的金柑果实用洗涤精毛刷刷洗干净,自来水冲洗后用75%酒精浸泡30-60秒,随后即可将果实提前放置于无菌室准备接种。在无菌条件下用0.1%氯化汞对果实表面消毒,消毒10分钟后用无菌水冲洗3-5次。切开果实,取出种子,种子可直接播种(发芽很慢)或用解剖刀剥去种皮取种胚再接种。
2.2 初代启动培养
将上述处理后的外植体接种到不含激素的MS培养基上,接种2-3天后胚乳张开,种胚开始萌动;5-10天左右胚芽、胚根突出,以后生长较快,叶片浓绿,茎秆粗壮,根系生长良好;15天苗高3-5厘米。
2.3 继代增殖培养
将形成的幼苗取上胚轴, 截成0.5-1厘米的节段转接到增殖培养基MS + NAA 0.5mg/L + 6-BA 2.0mg/L上,培养35天左右分化成苗,一般增殖周期为40天。
2.4 生根培养
将诱导分化出的无根苗转接到生根培养基1/2MS + NAA 0.02mg/L上,接种10-12天开始生根,23天左右长度可达1-2厘米,根较细,呈白色。生根率可达84%。
2.5 培养条件
以上培养基均附加30g/L蔗糖,7g/L琼脂,pH值5.8。培养温度为26℃,光照度为1500-2000lx,光照12小时/天。
评论