龟背竹(Monstera deliciosa)是天南星科龟背竹属植物,传统切茎育苗已无法满足市场需求,为了快速培育龟背竹苗木提供市场,对龟背竹组培再生技术进行了研究。
1 试验材料
以嫩茎作为外植体。
2 试验方法
2.1 外植体消毒
在晴朗的天气采回外植体,用自来水冲洗后浸泡于洗洁净溶液中,用毛刷轻轻刷洗外表污物,然后置于无菌操作台上,剪成茎尖和茎段(腋芽1~2个),分别放入无菌容器内,用75%乙醇消毒30秒,无菌水清洗干净后用0.1%升汞振荡灭菌8-15分钟,无菌水漂洗4-5次用滤纸吸干外植体表面水分,备用。
2.2 预培养
将上述处理的外植体,接种于初始培养基MS + NAA 0.2mg/L + 6-BA 1.0mg/L上,预培养10-15天获取无菌活体。
2.3 芽诱导培养
将无菌活体转接到芽诱导培养基1/2MS + NAA 0.7mg/L + 6-BA 2.0mg/L上,培养40天左右,芽长势良好。
2.4 芽增殖培养
将长2.0-2.5厘米的初代芽接种于继代培养基1/2MS + 6-BA 1.2mg/L + KT 0.3mg/L + NAA 1.1mg/L上进行增殖培养,培养7-8天后有2种情况,一是芽伤口肿胀、产生愈伤组织,继续培养后产生胚状体并形成不定芽,二是诱导休眠芽原基发育形成不定芽。
2.5 生根培养
将继代培养获得的高3-4厘米的健壮芽接种于生根培养基1/2MS + NAA 1.0mg/L +活性炭 0.1%上,15天左右即可发根,根系发育好,苗壮。
2.6 培养条件
以上培养基均附加25g/L蔗糖(生根培养基为20g/L),7g/L琼脂,pH值5.8。培养温度为25℃±2,光照度为1000lx,光照8-10小时/天。
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