猕猴桃属猕猴桃科(Actinidiaceae)猕猴桃属(Actinidia)多年生藤本植物，猕猴桃雌雄异株,倍性复杂,育种周期长。目前,‘海沃德’猕猴桃的常规育苗方法主要为实生苗的嫁接法和成年株的扦插繁殖法。嫁接苗童期生长缓慢,育苗周期长，扦插苗成活率和繁殖效率较低。传统育苗方法难以克服生产规模与市场需求的矛盾。本试验以‘海沃德’猕猴桃无菌苗的叶片为外植体，应用现代生物技术, 通过组织培养可实现‘海沃德’猕猴桃的快速繁殖, 在此基础上通过抗病基因的遗传转化能克服其栽培中的病害问题。
1 试验材料
试验材料为‘海沃德’猕猴桃组培苗，叶龄30天左右；外植体为长势良好的叶片。
2 试验方法
2.1 外植体消毒
本实验材料为组培瓶苗的叶片，所以无需进行外植体消毒环境，如果是采用母株采集外植体，请进行常规外植体灭菌后再接种。
2.2 芽诱导培养
无菌条件下, 叶片去叶缘和叶尖, 切割成大小为0.5x0.5厘米的叶盘接种到丛生芽诱导培养基MS + NAA 0.1mg/L + 6-BA 3.0mg/L上，暗培养30天后转入光照培养，再培养10天，暗培养7天左右, 叶片开始膨大(切口和叶脉处明显膨大)；15天左右出现芽点，30天后芽点发育成明显小芽, 呈浅绿色，转入光照培养后, 逐渐变成深绿色；40天后, 最高出芽率达80.95%，不定芽长度达2-5厘米。
2.3 芽增殖培养
分离、切割丛芽, 将生长状况基本一致、大小相同(长1厘米)的单个不定芽接种于芽增殖培养基MS + 6-BA 3.0mg/L + NAA 0.2mg/L + GA3 0.1mg/L上，培养30天，不定芽生长状态好，苗高2.5厘米以上，增殖率100%，增殖系数6.38左右。
2.4 生根培养
切取生长健壮、大小相同(长2 cm)的单个芽苗接种到生根培养基1/2MS + IBA 0.7mg/L上，10天左右开始发根，之后根迅速伸长，30天形成良好根系，不定根数量较多、较粗较长, 试管苗生长健壮，生根率100%。
2.5 培养条件
以上培养基均附加30g/L蔗糖，7g/L琼脂，pH值5.8。培养温度为25℃±2。不定芽诱导阶段为暗培养, 其余阶段均为光照培养，光照度为2000lx-2500lx，光照12小时/天。
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