海芋(Alocasia macrorrhiza (L.) Schott ),天南星科海芋属多年生草本植物。
1 试验材料
以顶芽作为外植体。
2 试验方法
2.1 外植体消毒
从盆栽的生长旺盛、无病虫害的海芋植株上切取顶芽,用刀削去附着在茎上的一些老化组织后,用自来水冲洗干净,吸干水,然后用75%酒精浸泡30秒,再用0.1%的升汞消毒10分钟,无菌水冲洗4-5次后,用灭菌纸吸干,备用。
2.2 芽诱导培养
将上述处理后的外植体接种到丛生芽诱导培养基MS + NAA 0.5mg/L + 6-BA 2.0mg/L上,约20天后顶芽开始萌动,并在基部形成愈伤组织。转至相同培养基上继续培养2次,约60天在芽基部可形成丛生芽及淡黄色愈伤组织。丛生芽和愈伤组织再生的植株叶片上可见母株的斑纹,并生成较多的健壮根系,根芽同时发生。
2.3 芽增殖培养
将芽诱导材料切分成单芽接种于继代培养基MS + 6-BA 3.0mg/L + NAA 0.2mg/L上,培养30天形成丛生苗,长势良好。
2.4 出瓶移栽
由于海芋在增殖培养中易产生带根植株,因此可省去生根培养阶段,而直接将生根小苗切下,用水小心洗掉附着的培养基后,移栽于珍珠岩和泥炭土(2:1)的混合基质中,浇透水,前期用90%的遮阳网遮阴,14天后改用70%遮阳网。
每天浇少量水,2周后可适当喷施叶面肥。1月后可喷施0.1%尿素或复合肥(15-15-15)。移栽成活率可达90%。移栽植株均可保持母株的花叶性状。
2.5 培养条件
以上培养基均附加30g/L蔗糖,7g/L琼脂,pH值5.8-6.0。培养温度为25℃±2,光照度为1500lx,光照12小时/天。
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