菊花(Chrysanthemum),为菊科(Asteraceae)菊属(Chrysanthemum)的多年生宿根草本植物,目前菊花的繁殖一般采用扦插、分株等传统方法,以及组织培养、离体快繁、工厂化生产等高新技术,可在短时期内获得大量菊花种苗。本文对菊花的组织培养技术进行研究,以期为菊花在园艺植物工厂化生产中的应用提供理论依据。
1 试验材料
若以快速繁殖为目的,应采用茎尖和侧芽,其次是花序轴;若以育种为目的,则应采用花瓣;若以脱毒为目的,则必须用茎尖。本研究以花序轴为外植体时,在9月份选取饱满壮实的含苞待放的花蕾(内部无菌)作为材料。
2 试验方法
2.1 外植体消毒
取开花前2-3天将要开放的菊花花蕾,放入烧杯中,先用自来水冲洗10分钟;然后在已灭菌的超净台上,用75%的乙醇浸泡30秒后,用无菌水冲洗2次,再用 0.1%的升汞消毒10分钟,用无菌水冲洗4-5次;最后放入已灭菌有滤纸的培养皿中,在无菌的条件下,剥除花序轴外层花被,得到半球形的花序轴,把花序轴切成4块。
2.2 芽诱导培养
将上述处理后的花序轴切块接种到丛生芽诱导培养基MS + NAA 0.1mg/L + 6-BA 2.0mg/L上,3天后外植体膨大,12天后分化出芽,30天后芽分化基本停止,当芽苗达2厘米时即可转瓶进行继代培养。
2.3 芽增殖培养
将芽诱导材料切分成单芽接种于继代培养基MS + 6-BA 1.0mg/L + NAA 0.1mg/L上,4-5周继代一次,繁殖系数可达5-10左右。
2.4 生根培养
在增殖培养基中培养30天,芽苗达3厘米时,将单株嫩芽切下转接到生根培养基1/2MS + NAA 0.1mg/L中,培养2周即可生根,培养4周,根大于1厘米长时即可出瓶移栽。
2.5 培养条件
以上培养基均附加30g/L蔗糖,7g/L琼脂,pH值5.8-6.0。培养温度为25℃±2,光照度为1500lx,光照12小时/天。
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