德国鸢尾(Iris germanica L.)属百合目、鸢尾科、鸢尾属多年生草本,传统生产以分株繁殖为主,繁殖系数低,且易感染软腐病,很难在短时间内获得大量优质种苗,无法满足市场需求,通过组织培养可以快速繁殖大量优质种苗,可有效解决上述问题。本研究中以优良耐寒德国鸢尾新品种为试材,探讨建立组培快繁体系的适宜条件,为其试管苗的工厂化生产提供理论依据。
1 试验材料
选择露地栽培生长旺盛的德国鸢尾秋季萌芽幼龄株作为外植体(西宁市,11月份)。
2 试验方法
2.1 外植体消毒
将幼株用流水冲洗干净,剪去残叶、根系,于10%洗衣粉液中浸泡15分钟,并不断搅拌,再用流水冲洗干净,在纯净水中冲洗两次,置超净工作台上。在接种前用75%酒精中浸泡30秒,无菌水冲洗4次,再用0.1%升汞溶液浸泡4分钟后,无菌水冲洗8次,在无菌水中将近茎尖2mm区域的组织切成2mm×2mm×2mm大小的外植体块,备用接种。
2.2 芽诱导培养
将上述处理后的外植体接种到诱导培养基MS + NAA 0.2mg/L + 6-BA 0.5mg/L上,经7天左右培养,有淡绿色瘤状愈伤组织块出现;15天愈伤组织与叶片有所增大,50天后,愈伤组织继续增大,有丛生芽产生。
2.3 芽增殖培养
将上述产生的丛生芽接种于继代增殖培养基MS + 6-BA 1.0mg/L + NAA 0.1mg/L上,经25天培养,可分化出大小一致的芽苗。
2.4 生根培养
增殖培养的芽长至2厘米时,可将其切为单芽转接到生根培养基1/2MS + NAA 1.0mg/L中。20天左右开始生根,40天左右根系克长到1-2厘米。
2.5 炼苗移栽
当平均根长达1-2厘米左右时,不经炼苗,直接出瓶。将根部培养基冲洗干净,栽入经消毒处理过的泥炭:珍珠岩=7:3基质中。栽植后保持土壤湿度适中,空气湿度从80%起逐天降低室内正常湿度,种植后前3天用50%遮荫网进行遮盖。
2.6 培养条件
以上培养基均附加30g/L蔗糖,7g/L琼脂,pH值5.8。培养温度为25℃,光照度为2000lx,光照12小时/天。
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