非洲菊(Gerbera jamesonii Bolus)别名扶郎花,原产南非,为菊科多年生宿根草本花卉。非洲菊中上乘品种多为F1代,很少授粉结籽,且分株繁殖速度慢,产苗量低。想要保持种性不变,大量快速繁殖商品苗,最好是采用组织培养繁苗,组织培养已成为目前非洲菊繁殖的主要方式。
1 试验材料
从生长健壮、品种纯、花色好、无病虫害的切花非洲菊植株上采取直径在0.6-1.0厘米间的幼嫩花蕾,并取花托作为外植体材料。
2 试验方法
2.1 外植体消毒
将取回组培室的幼嫩花蕾按下列程序进行处理:自来水反复冲洗,洗去表面污物,用5%洗衣粉水溶液浸泡10分钟,再自来水流水冲洗10-12分装,接着70%酒精浸泡10秒,用0.1%升汞溶液中消毒8分钟,最后无菌水冲洗5次。用消毒滤纸吸干表面水分,将花蕾的花萼、花瓣剥去,留下花托,在无菌条件下待用。
2.2 愈伤组织诱导
将上述处理后的花托,接种到愈伤组织诱导培养基1/2MS + NAA 0.2mg/L + KT 8.0mg/L上,经10-15天培养后,外植体明显膨大,并逐步产生瘤状愈伤组织。
2.3 芽增殖培养
将诱导产生的愈伤组织及幼芽丛转接到继代增殖培养基MS + 6-BA 1.0mg/L + IAA 0.2mg/L上,增殖速度快,数量大。建议继代培养周期20-25天。
2.4 生根培养
将增殖的丛生芽分割成每块3-5个小芽的丛芽簇,转接到MS培养基上,进行生根培养,因簇生苗生长具有群体效应,簇生苗的炼苗成活率高于常规生根法,炼苗30天左右,小苗株高达10cm左右,根系长8-15厘米,此时适宜分株,将簇生苗分株栽营钵里或直接大棚定植,根据根系情况和小苗长势,每簇分3-5株小苗,每株小苗要有新根。分株小苗基本全部成活,没有缓苗期,苗子过大缓苗时间长,影响生长。采用簇苗生根技术,生根前不需要转到壮苗培养基上壮苗。同样培养条件下簇生苗生根较单株苗规生根法获得的苗数至少增加了一倍,而且节约转接时间和成本。
2.5 炼苗移栽
试管苗驯化经过20-25天生根培养,根系长达3厘米左右,可驯化出瓶炼苗。生根苗在出瓶前1天封口膜揭开驯化,以适应外界环境条件。揭口要适度(约1/3~1/4),揭口不要太大,否易出现苗叶干枯;揭口太小,影响瓶内外气体交换。取出小苗,冲洗净根部培养基,移栽基质中,栽苗深度以茎基部为准,露出生长点,防止感菌腐烂。
2.6 培养条件
以上培养基均附加30g/L蔗糖,7g/L琼脂,pH值5.8-6.0。培养温度为25℃±2,光照度为1500-2000lx,光照12小时/天。
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