樱花属蔷薇科李属植物,落叶乔木,又名山樱花、青肤樱、福岛樱等;樱花常以嫁接繁殖为主,也可扦插、分株繁殖,但繁殖系数低。本文对樱花的组织培养进行了研究,获得了完整植株。
1 试验材料
于4月下旬或5月上旬,剪取樱花新生枝条,清洗后剪去嫩叶,以2-3厘米的枝梢为外植体。
2 试验方法
2.1 外植体消毒
将剪好的枝梢,用自来水冲洗干净,用0.1%的升汞溶液消毒10分钟,无菌水冲洗4-5次,剪成带有1个单芽的茎段,备用。
2.2 芽诱导培养
将上述处理后的外植体接种到不定芽诱导萌动培养基MS + NAA 0.2mg/L + 6-BA 3.0mg/L上,接种3天后, 叶柄开始脱落;5天后腋芽开始萌动;7天后,可看到2片细小嫩叶;10天后叶片大部分展开;20天后,已具备两层叶片无菌芽。
2.3 芽增殖培养
将初代培养所得的无菌苗切割成0.5-1厘米的切段,接种于继代增殖培养基MS + 6-BA 0.1mg/L + NAA 0.05mg/L上,进行增殖培养,以获得丛生芽。
2.4 生根培养
将丛生芽分株或切割成2厘米以上的切段,转移到生根培养基1/3MS + NAA 0.3mg/L上,进行生根诱导,生根率可达95%以上。
以上培养基均附加30g/L蔗糖,7g/L琼脂,pH值5.8-6.0。培养温度25℃±2,光照度为2000lx,光照14小时/天。
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