墨兰 (Cymbidium sinense) 又称为报岁兰, 为兰科兰属常绿多年生草本花卉,墨兰的繁殖多采用分株法,其生长速度慢、分蘖少(1年1-2株),这种繁殖方式很慢,不利于墨兰名贵品种的生产、开发及新品种的选育与推广,同时长期分株繁殖使植株带有病毒,用组织培养可以加快墨兰的繁殖。
1 试验材料
墨兰的组织培养主要用种子作为外植体。
2 试验方法
2.1 外植体消毒
采收九成熟的墨兰蒴果在70%的乙醇中消毒15分钟,无菌水冲洗3次,取种子接种到种子诱导培养基上。
2.2 原球茎诱导
将处理好的种子接种在诱导培养基1/2MS + NAA 5mg/L + 椰子汁10% + 活性 2g/L,经过3个月培养,种子形成原球茎。
2.3 芽增殖培养
待根状茎长至2-3厘米长时,从基部掰开并切成1厘米长,接种在增殖培养基1/2MS + 6-BA 5.0mg/L + NAA 0.5mg/L + 椰子汁5%上,后可见根状茎膨大,在顶端或侧端分化出芽,出芽率达97%以上,芽生长健壮。培养至30天时,芽开始长出两片真叶
2.4 生根培养
待芽长至2-3厘米时,转移到生根培养基1/2MS + 6-BA 2.0mg/L + NAA 1.0mg/L + 活性炭 5%L上。20天后,根状茎基部分化出白色的根、约 3~4条,形成完整的植株。再经1个月的培养,试管苗已完全成熟。全株长8-10厘米时,洗净苗基部附着的培养基,移栽于经筛选消毒的细沙、泥炭、椰糠(1:1:0.5)混合基质中,上面用塑料薄膜保温,相对湿度90%以上。移栽的试管苗成活率95%以上,试管苗生长快,叶色鲜绿,1-2个月即可盆栽
2.5培养条件
培养基中均添加3%的蔗糖和0.7%的琼脂,pH值均为5.8,培养温度25±2℃,光照强度2000-3000lux,光照时间12小时/天。
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