玫瑰(Rose rugosa Thunb.) 是蔷薇科(Rosaceae) 蔷薇属直立落叶丛生灌木,常规玫瑰繁殖方法主要有: 扦插、压条、分株等,然而这些方法的繁殖率较低,组织培养技术不仅克服了常规繁殖方法繁殖系数低的缺点,本研究以“大马士革”玫瑰为试材,从外植体取材、激素配比等方面探讨玫瑰当年生枝条快速繁殖问题,以期为玫瑰的组培快繁提供理论依据和技术支持。
1 试验材料
11月份,选择生长健壮、无病 虫害的二年生健康植株作试材,取当年生枝条顶端的嫩茎作为本试验外植体材料。
2 试验方法
2.1 外植体消毒
剪取当年生带有腋芽的嫩茎,置于自来水下冲洗30分钟,剪取中段半木质带腋芽的小段,每一段均含有至少 1 个腋芽,先用75%乙醇消毒30秒,无菌水冲洗 1-2次,然后用0.1%升汞消毒20分钟,之后再用无菌水冲洗3-5次,备用。
2.2 芽诱导培养
将上述外植体处理后接种在芽诱导培养基MS + 6-BA 1.0mg/L + NAA 0.1mg/L上,将无菌茎段倾斜插入培养基上,保持腋芽朝上,培养20天左右,萌芽率可达97.5%。
2.3 芽增殖培养
初代培养分化产生的不定芽长到2厘米左右时,将其分开切成单个芽,接到增殖培养基MS + 6-BA 1.0mg/L + NAA0.05mg/L中,培养30天左右,增殖系数4.2左右。
2.4 生根培养
将增殖培养基中生长健壮的组培苗切分为单芽,选取2厘米以上组培苗,转移到生根培养基MS + NAA 0.05mg/L上。培养15天,生根率达43.2%,培养30天左右,生根多且健壮。
2.5 培养条件
培养基中均添加3%的蔗糖和0.7%的琼脂,pH值均为5.8-6.0,培养温度25±1℃,光照强度2000lux,光照时间12小时/天。
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