西洋杜鹃(学名:Rhododendron hybridum Ker Gawl.)是杜鹃花目,杜鹃花科常绿灌木,本试验对比利时高山杜鹃品种Rhododendron britannia的组培方法进行了探讨,旨在建立离体快繁技术平台和为实施离体诱变及转基因研究提供技术支撑。
1 试验材料
于4-5月间摘取顶芽和侧芽作外植体。
2 试验方法
2.1 外植体消毒
将摘回的外植体经表面修整后,用淡肥皂水浸泡10分钟后,以自来水冲洗1-2小时后,转入超净台,用0.1%的升汞溶液中消毒8-10分钟,再以无菌水冲洗5次,吸干水分后备用。
2.2 芽诱导培养
将上述外植体处理后接种在诱导培养基Read + 0.1%活性炭上,培养4周左右,诱导率达85%。
2.3 芽增殖培养
将诱导培养中诱导出腋芽的接到增殖培养基Read + ZT 0.5mg/L + NAA 0.05mg/L +0.1%活性炭上中,培养4-5周左右,增殖多且健壮,叶色深,增殖系数高达6.7,生长状态很好。
2.4 生根培养
将增殖培养基中生长健壮的组培苗切分为单芽,选取2厘米以上具有完整顶尖的组培苗,转移到生根培养基1/2Read + IBA 1.0mg/L + 0.1%活性炭上。培养4-5周左右,生根多且健壮,生根率达84%。
2.5培养条件
培养基中均添加3%的蔗糖(生根培养基为2%)和0.6%的琼脂,pH值均为5.4,培养温度22±1℃,光照强度1800lux,光照时间12小时/天。
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