圆锥绣球(学名:Hydrangea paniculata Sieb.)是虎耳草科绣球属植物,灌木或小乔木,本研究旨在通过对圆锥绣球优良品种‘北极熊’(Hydrangea paniculata 'Polar bear')的带芽茎段进行外植体的处理、诱导、增殖壮苗与生根各阶段的组培快繁技术进行研究,探究不同处理方式及培养方法对其组培繁殖的影响,为研究圆锥绣球快繁技术提供一定的技术参考。
1 试验材料
4月份,选取当年生的健壮幼嫩且无病虫害的茎尖和带腋芽茎段作为试验材料。
2 试验方法
2.1 外植体消毒
将带回的枝条从叶基部剪去叶片,不可伤害顶芽和腋芽。将枝条先用75%百菌清1000倍液浸泡约10分钟后冲洗,再用洗衣粉溶液浸泡约5分钟,然后流水冲洗 1-1.5小时,再将枝条修剪成2-3厘米的小段,以备消毒灭菌。
在超净工作台内,将冲洗好外植体茎段放入无菌空瓶中,每次放入10个,先用75%酒精浸泡消毒60秒,无菌水冲洗3-5次,再用0.1%的升汞消毒2次,每次4分钟,每次用无菌水冲洗3-5次,最后将其修剪成1厘米左右的单芽茎段(顶芽或腋芽均可, 两端或末端与药液接触部分需稍微剪除),接种在启动培养基中。
2.2 诱导培养
将上述外植体处理后接种在启动培养基MS + 6-BA 0.5mg/L + NAA 0.06mg/L上,经25天培养,启动诱导率可达84.2%。
2.3 增殖培养
将启动培养中诱导出腋芽的,无污染且生长良好的茎段取出,剪掉基部愈伤组织和下部能接触到培养基的叶片,将其剪成1.5厘米左右的单芽茎段,接到增殖培养基MS + 6-BA 2.0mg/L + NAA0.5mg/L中,接入深度至培养基中部,培养25天左右,增殖多且健壮,叶色深,增殖系数高达6.0,生长状态很好。
2.4 生根培养
将增殖培养基中生长健壮的组培苗切分为单芽,选取2厘米以上具有完整顶尖的组培苗,转移到生根培养基1/2MS + IBA 1.0mg/L + NAA 0.2mg/L上。培养30天左右,生根多且健壮。
2.5培养条件
培养基中均添加3%的蔗糖(生根培养基为2%)和0.65%的琼脂,pH值均为5.8,培养温度23±2℃,光照强度2000-3000lux,光照时间12小时/天。
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