美国红枫“白兰地”(Acer rubrum ‘Brandywine’)原产地美国,系槭树科槭树属,高大落叶乔木。本研究旨在建立较完善的白兰地组织培养与快繁技术体系,为园林绿化提供大量优质彩叶苗木,并为白兰地的改良、转基因和基因图谱的研究提供试验材料。
1 试验材料
试验材料为2年生白兰地扦插苗。于3-5月份时段,选取健康的带腋芽的茎段为外植体。
2 试验方法
2.1 外植体消毒
把采集的茎段流水冲洗2-4小时;加入洗涤剂冲洗至无泡沫;75%乙醇浸泡30秒;0.1%升汞浸泡12分钟;无菌水清洗3次。再将洗涤好的外植体用滤纸吸干,转入无菌工作台,将带腋芽的茎段剪成长约2厘米的小段,3%次氯酸钠消毒处理时间8分钟进行处理,再将带腋芽的茎段除去受药害部分,剪成长约1厘米的小段,待接种。
2.2 芽诱导培养
将上述外植体处理后接种在芽诱导培养基WPM + 6-BA 1mg/L + IBA 0.5mg/L上,培养20天左右,诱导率可达73.3%。
2.3 芽增殖培养
将经过启动培养的健康外植体转到增殖培养基WPM + TDZ 0.002mg/L + NAA 0.4mg/L上,培养20天左右,外植体增殖系数最大,为1.37,植株长势良好,愈伤组织大且呈黄绿色,叶大且绿、茎粗。
2.4 壮苗培养
将增殖苗转到壮苗培养基WPM + NAA 0.5mg/L + GA3 1.0mg/L上,培养25天左右,苗的长势好,茎粗且伸长明显,叶大且绿。
2.5 生根培养
将经过壮苗培养的苗高1.5-2厘米的健壮苗转入生根培养基MS + IBA 2mg/L + GA3 1.0mg/L上,培养15天左右,可见根点长出,25天左右生根率可达93.3%。
2.6培养条件
培养温度25±2℃,光照强度1600-2000lux,光照时间12小时/天。
2.6 组培苗移栽
当瓶苗长到4厘米高时可炼苗移栽。组培苗的炼苗移栽以先闭盖锻炼6天,后开盖锻炼2天,再移栽到沙与腐殖质等比混合的基质中,存活率最高,达86.7%。
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