巨尾桉(学名:Eucalyptus grandis x urophylla )是桃金娘科桉属植物,常绿乔木,为巴西培育的巨桉和尾叶桉的杂交种。
本研究通过巴西桉树引种试验,从中选择出优良单株进行组织培养技术探讨,以培育适宜当地的优良尾巨桉组培苗,为其工厂化育苗提供技术参考,也为桉树种质资源的有效保存和构建桉树遗传转化体系建立基础。
1 试验材料
3 月对优树进行环割促萌。4 月在优树环割处生长出的萌芽条上采集腋芽尚未萌发的侧梢和顶芽,并带回实验室以备用。
2 试验方法
2.1 外植体消毒
将侧梢和顶芽除去叶片,剪成2厘米左右的带芽茎段,用流水冲洗小时左右。在超净工作台上用75%酒精的升汞水消毒30秒,无菌水冲洗3次,再用0.1%的升
汞水消毒10分钟,无菌水冲洗4次。用滤纸吸干茎段上的水分,切成0.5-1厘米的带芽茎段,用于接种。
2.2 芽诱导培养
将上述外植体处理后接种在芽诱导培养基改良MS + 6-BA 0.5mg/L + NAA 0.2mg/L上,茎段接种5天后出芽,30天芽高0.5厘米以上,芽长势正常。
2.3 芽增殖培养
芽诱导培养后形成的生长健壮的含有多个芽的芽丛切割成单芽,接种在芽增殖培养基改良MS + 6-BA 0.5 mg/L + NAA0.15 mg/L上,培养30天左右,增殖率为3.86,平均芽长为2.17厘米。
2.4 壮苗生根培养
当不定芽长到2-3cm高时,转移到生根培养基1/2MS + NAA 0.15mg/L + IBA 1.0mg/L上。培养20天左右,生根率为82.5%,平均根数5条。
2.5 培养条件
培养基中均添加3%的蔗糖和0.7%的琼脂,pH值均为5.8,培养温度25±2℃,光照强度2000lux,光照时间12小时/天。
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