茶树组培快繁技术实例含配方

茶树是一种常绿木本植物，有性繁殖得到的种子遗传性状混杂，品质不稳定，故生产上常用无性的扦插繁殖。组织培养由于具有快速繁殖、去除病毒等优点而在茶树繁殖上得以利用。本研究对茶树组织培养技术体系进行探索，以期为茶树良种组培快繁规模化生产提供可靠的技术措施。

1 试验方法

1.1 外植体预处理

8-9月份选取未成熟茶果，经水清洗后剥去果皮，取出尚未成熟的乳白或略带棕色的种子，剥开外种皮，在无菌条件下，75%乙醇表面消毒30秒后，用0.1%升汞浸泡3分钟，再用无菌水漂洗6-8次。将含未成熟胚的子叶切成长度为0.5厘米大小的方块，置于无菌滤纸上吸干表面水分后接种诱导培养基上。

1.2 芽诱导培养

将上述外植体处理后接种在芽诱导培养基ER + 6-BA 1mg/L + NAA 0.1mg/L上，培养20天。

1.3 分化培养

将经诱导并呈现绿色的子叶愈伤组织转移至分化培养基ER + 6-BA 2.0 mg/L  + IBA 0.1mg/L上，培养20天。

1.4 壮苗培养

将高度小于1厘米的弱分化苗转接到壮苗培养基ER + 6-BA 1mg/L + NAA 0.1mg/L + GA3 1mg/L上，培养15天，强壮的分化苗可直接接到生根培养基，进行生根培养。

1.5 生根培养

当分化苗或经壮苗培养的分化苗长到3-5厘米时，转接到生根培养基1/2MS + KT 1mg/L + IBA 0.2mg/L上，培养30天左右。

1.6培养条件

所有培养基均添加30g/L蔗糖，6g/L琼脂，0.1g/L氯霉素，pH5.6-5.8°，121℃高压灭菌20分钟。其中半量培养基中的大量元素和蔗糖均减半，光照强度1500-2000lux，光照时长13小时/天。