多花黄精 Polygonatum cyrtonema Hua 是百合科黄精属多年生草本植物，它繁殖方式主要是有性繁殖（种子）和无性繁殖（根茎）两种方式。由于黄精种子难收集、种子发芽率低、而且种子繁殖育苗时间又长，这样就大大增加了黄精的栽培成本，种苗问题成了人工大面积种植的瓶颈。而现有黄精栽培基地的黄精品种也迫切需要对其进行提纯复壮，以培育高产抗病脱毒的种苗，此次试验对黄精的繁殖从无菌体系到种苗这一过程进行系统研究，以期直接供生产实践应用，从而促进黄精种苗的工厂化生产。
1 试验材料
多花黄精带芽根茎。
2 试验方法
2.1 外植体消毒
由于采用黄精的带芽根茎，不可避免会在其表面附着许多杂菌，采用常规的灭菌方法污染较严重。延长灭菌时间，外植体损伤较重，不利于增殖。
本次外植体消毒流程：将黄精根茎从土中挖出，洗去泥土；用刀切取带芽根茎于洗洁精水溶液中浸泡5分钟，然后用自来水冲洗干净；再用75%乙醇擦洗表面，再用自来水冲洗干净；然后用洗洁精水浸泡5分钟，自来水冲洗60分钟；（以下步骤在超净工作台中完成）用75%乙醇浸泡30秒，无菌水清洗2次后，2.5%次氯酸钠浸泡3次，每次5分钟，期间用无菌水清洗2次，取出用无菌滤纸吸干水份，用刀切去伤口坏死部分准备接种。
采用多次短时灭菌法，虽然延长了灭菌时间，但降低了污染概率和灭菌剂对外植体的损伤。
2.2 芽诱导培养
将上述外植体处理后接种在芽诱导培养基MS + 6-BA 2mg/L + 2,4-D 0.2mg/L上，30天后外植体均明显膨大，获得大量的无菌材料。将膨大的外植体切成0.25平方厘米小块接于上述培养基，再培养30天，即可获得大量无菌材料。
2.3 芽增殖壮苗培养
将分化有不定芽的块茎切成直径0.5厘米大小接于不定芽的增殖与壮苗的培养基培养MS + 6-BA 4.0mg/L + 2,4-D 0.2mg/L + GA3 0.5mg/L上，培养45天左右，每块可增殖6-8棵可用于生根的无根苗，苗壮。
2.4 生根培养
将得到的粗壮无根苗（同带芽根茎）单个切下接于生根培养基1/2MS + IBA 0.7mg/L上。培养30天左右，生根率可达95%。
2.5 培养条件
培养基中均添加3%的蔗糖和0.5%的琼脂，pH值均为5.8-6.0，培养温度25±2℃，光照强度1500-2000lux，光照时间12小时/天。
2.6 组培苗移栽
将已生根的黄精带芽根茎敞口炼苗3天，选取根数在4棵以上、平均跟长1cm以上的黄精根茎,用自来水冲去琼脂,栽种到基质（珍珠岩与蛭石2∶1混合）中。每隔7天施用1次营养液，30天后统计成活率达到85％以上。
评论