草莓(Fragaria ananassa Duch.)属于蔷薇科草莓属宿根性多年生草本植物,草莓繁殖主要通过匍匐茎分株提供种苗,效率较低,不利于优良品种推广。在长期无性繁殖中,植株往往积累多种病毒,导致种苗退化,产量和品质下降,成为阻碍草莓生产的主要问题。应用离体培养技术不仅可以快速繁殖大量优质草莓种苗,有利于品种提纯和更新,而且还可用于脱除病毒和无病毒种苗繁殖,加快新品种推广。为保证红颊草莓工厂化育苗、规模化、立体化生产,笔者对这一品种进行了组培研究,逐步建立稳定的高频再生系统。
1 材料
4-5月红颊草莓匍匐茎的茎尖。
2 试验方法
2.1 外植体处理
从健壮的植株上剪取未展叶的匍匐茎约5厘米,带回实验室进行消毒处理,取约1.5厘米的匍匐茎尖用流水冲洗90-120分钟,先用75%乙醇消毒30秒,再用无菌水冲洗3-5次,然后用0.1%氯化汞处理8-10分钟,最后用无菌水冲洗5-6次。在超净工作台上的解剖镜下剥离草莓茎尖约0.5毫米,接入诱导分化培养基中。
2.2 诱导分化培养
将上述灭菌后的外植体接种在诱导培养基MS + 6-BA 0.2mg/L + NAA 0.05mg/L中,培养20天左右, 采用未展叶的茎尖诱导率高,无污染,当6-BA浓度偏高后,可能产生玻璃化。
2.3 继代增殖培养
将诱导出的健壮试管苗转接到继代培养基上MS + 6-BA 0.3mg/L中,培养30天左右,增殖系数约为3.8。
2.4 生根培养
将生长健壮的无根小苗转接到生根培养基为1/2MS + IBA 0.05mg/L中,培养25天,生根率和生根质量最好,植株长势好,根多、粗壮,须根也多,根白色。
培养条件:温度(25±1)℃,pH5.5,光照强度2000lux左右,每天光照16小时,以上培养基均添加0.7%的琼脂和3%的蔗糖。
2.5 炼苗移栽
在珍珠岩:蛭石=1:1的基质类型中,草莓的成活率最高,达到95.27%。炼苗20天后,各基质成活苗根长均为7厘米以上,以珍珠岩:蛭石=1:1基质中的
根数最多,达到11.00条/株。
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