常绿欧洲荚蒾(Viburnum opulus var.)为忍冬科荚蒾属常绿小乔木,是欧洲荚蒾的变种。,本试验对常绿欧洲荚蒾外植体灭菌、腋芽诱导和增殖培养进行了研究,旨在为进一步建立和完善常绿欧洲荚蒾组织培养繁殖体系提供技术基础。
1 试验材料
以重庆文理学院农场引种的常绿欧洲荚蒾植株为材料。
2 试验方法
2.1 外植体的灭菌
从植株上剪取带腋芽的枝条,切成1cm左右带腋芽茎段,用流水冲洗20-30分钟。在超净台上用70%乙醇表面灭菌30 秒,无菌水冲洗1次,接着用0.1%升汞灭菌,处理8分钟,然后用无菌水冲洗5次,接种在启动培养基中。
2.2 启动培养
选取cm左右带腋芽茎段接种在MS + 6-BA 1.0mg/L + NAA 0.3mg/L + 蔗糖2% + 琼脂0.6%培养基中,7天后腋芽开始萌发,继续培养至30天,萌发率均为90%,芽生长快,绿色,茎段粗壮,并且叶色浓绿。
2.3 增殖培养
选取启动培养得到的芽体接种在MS + 6-BA 0.5mg/L + NAA 0.2mg/L + 蔗糖2% + 琼脂0.6%的培养基中,培养30天,不定芽增殖效果好,主茎明显,生长健壮,叶片平展。
上述培养基的培养条件:光强约1500lux,温度(25±2)℃,光照时间12小时/天。
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