袋式组培优越性及操作要点

康倍斯
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2021年12月7日14:28:47 评论 669

本文综合了多方实验报告,对比了袋式组培技术与传统瓶式组织培养对影响生产成本的主要技术指标(生长状况、污染状况、培养基利用率等)的实验情况,并对实际应用中的技术要点进行了总结。(点击购买组培袋

袋式组培优越性及操作要点

1材料和指标选择

1.1试验材料

耐高温高压聚丙烯透明薄膜袋(规格12X15厘米,厚度0.05毫米),玻璃广口瓶(350mL)。PVC塑料瓶成本昂贵,不适宜大规模使用,不作对比。

1.2指标选择及测定

选择单位容器的培养基用量、培养空间利用率、容器投入成本、污染率及生长状况等对生产影响较大的几项内容为观测指标。

2结果与分析

2.1袋培苗与瓶培苗生长状况比较

综合多方报告得出,袋培苗与瓶培苗生长状况统计数值均无显著差异,因此,袋式容器替代传统瓶式容器进行组培生产是可行的。

2.2袋式容器与瓶式容器投入成本的比较

由于容器规格,采购规模等因素不同,单价会有所不同,故本文仅作方向性对比,不列出具体数据(下同)。

传统的试管苗生产多是采用玻璃容器,与聚丙烯薄膜袋相比,一次性投入在30倍以上。即使考虑到薄膜袋为一次性使用,玻璃容器可以多次重复使用的因素,在单价上也有5倍的差距。

如果算上生产过程中瓶子破损、清洗、搬运、仓储、采购玻璃瓶以及出售瓶苗的运费、资金占有等造成的成本增加因素,这对生产中资金的有效使用及综合成本降低有很大的意义。

2.3单位培养容器培养基用量的比较

培养基的用量是工厂化育苗成本的一个重要组成部分,因此减少培养基用量,提高培养基利用率,是降低生产成本的有效途径之一。

传统的瓶培技术一次需装入30mL的培养基,而袋培是以培养沟的形式装入培养基,一般只需装15-20mL就可达瓶培装入30mL时所达到的高度,可以节省33%以上的用量。

由于培养基装入量的减少以及薄膜袋的柔软性,提高了灭菌锅单次的灭菌量,从而提高了灭菌效率,降低灭菌耗电以及人工费。

2.4袋式容器与瓶式容器培养架空间利用状况比较

培养室的电能消耗是工厂化育苗成本的又一项重要支出,因此提高培养室利用率,是降低生产成本的有效途径之一。

因袋培容器的底面呈长条形,摆放时可以很好地利用空间,相对于瓶式组培,袋培空间利用率可提高50%左右。

在夏季高温期内,瓶培置放空间大,培养相同数量的组织培养苗需光照灯就多,开灯不但浪费电能,而且还会使室温升高,这意味着要增加制冷而用去更多的能源。利用袋培可以在减少培养面积和开灯数量的同时,也使光照与降温之间的矛盾得到了很好的解决。

2.5袋培苗与瓶培苗污染状况比较

试管苗污染控制是工厂化育苗中最重要的一个环节,试验表明,袋培苗污染率比瓶培降低了有所降低。其主要原因是袋式培养在接种后即用封口机将袋口全部封死,避免了培养过程的2次污染。而瓶式培养则是采用人工包扎瓶口,难免存有空隙或松动,使真菌孢子等易随空气进入瓶内造成污染。

2.6瓶培与袋培对组培周期的比较

传统瓶式组培从启动到生根培养都在培养室里进行,而当前一种新的技术——瓶外生根(回复2005查看相关文章),将生根培养与炼苗有机的结合在一起,缩短组培周期,而且组培苗也更健壮,提高移栽成活率,而袋式组培也同样能达到瓶外生根的目的,袋式组培生根苗因密封性好,接种后可以直接搬到炼苗棚(室)进行边促根边炼苗的培养,免除了瓶式生根苗先摆放在培养室培养的环节和费用。

3结语与讨论

(1)袋式组织培养与瓶式组织培养对培养物生长状况无显著影响,说明袋式组培可代替瓶式组培。

(2)利用袋式培养的方法进行工厂化育苗容器一次性投入仅为瓶式培养的20%,加上其他耗费,成本会更低。

(3)袋培不存在2次污染或2次污染程度较轻,大大降低了生产过程中的污染率。

(4)大多数植物利用袋式培养方法降低综合成本是可行的,某些植物特殊的繁殖特性可能使得其无法在袋式容器中培养,或某些繁殖阶段无法在袋式容器中培养,袋式培养方法有一定的局限性,但生产中有选择地使用袋式培养或与瓶式培养搭配使用的方法仍是降低生产成本的有效途径之一。

4实际应用中的操作要点

袋式组培在操作上与传统的瓶式组培差不多,除了需要注意以下几个要点:

4.1培养基分装要点

先将袋口搓开,用橡皮胶管进行灌装,将胶管引入袋底注入适量培养基(一般为15-20mL),然后将袋口折叠封口(非密封),注意培养基不沾袋口,以免日后引起污染。

分装过程不时搅拌待分装的培养基,否则先、后分装的各袋培养基,其凝固能力会不同。

4.2灭菌要点

由于塑料组培袋薄而软,分装后难于固定,因此灭菌时先装入合适的容器中固定,如:将分装好袋的袋口向上排放入保鲜盒内,盖上盒盖,然后装入灭菌锅中,在压力为1.1kg/cm2、温度为121℃的条件下灭菌20分钟。

灭菌完毕后,切断电源,要缓慢放出蒸汽,不要排气过快,否则使压力降低太快,引起激烈的减压沸腾,使薄膜袋内的液体四溢,特别是加了有机添加物的培养基喷洒后易玷污袋口,造成污染。

4.3 接种要点

接种过程要轻柔,以免刀具、镊子等划破袋子;没有封口的培养基要及时接种并用封口机(要用酒精消毒)密封袋口,不能放置太久。在继代转接的过程中,剪开袋口的剪刀也要用酒精消毒。

4.4 培养要点

组培苗对培养环境的光照和温度较玻璃瓶敏感,遇上高温、强光易出现灼伤苗现象,或温度过低时较瓶式易受冻害,所以培养室要注意这方面。

康倍斯
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