蝴蝶兰(Phalaenopsis)为兰科蝴蝶兰属植物,它是一种热带气生兰,俗称“洋兰”。
本研究以蝴蝶兰带休眠芽的花梗为外植体进行组织培养,探讨其再生体系,以期为蝴蝶兰的快速繁殖提供参考。
1 材料与方法
1.1 外植体材料及培养条件
1.1.1 外植体选择
取已过盛花期带休眠芽的花梗作为外植体材料。
1.1.2 外植体预处理及灭菌
切下其带芽茎段,长约2-3厘米,用自来水清洗干净,在饱和漂白粉上清液中浸泡15分钟,浸泡时不断搅动,浸泡后的茎段用流水冲洗干净,置于超净工作台上,先用75%的酒精消毒30秒,无菌水清洗1次,再用,0.1%的升汞浸泡10分钟,经无菌水冲洗数次。
1.1.3 培养条件
芽诱导培养基:1/2MS + 6-BA 2.5mg/L + NAA 0.2mg/L
增殖培养基:1/2MS + 6-ba 3.5mg/L + KT 0.1mg/L + NAA 0.5mg/L + 椰汁10%
生根培养基:1/2MS + 6-BA 1.5mg/L + NAA 0.3mg/L + 80g/L 香蕉泥
以上配方均含30g/L 蔗糖 7g/L琼脂 pH5.5
培养环境:培养温度:25±2℃,光照强度1600lx,光照时长12小时/天。
壮苗培养基:1/2MS + 蔗糖 10g/L +琼脂粉 3.5g/L + 活性炭 1.5g/L
培养条件:培养温度:25±2℃,光照强度2000lx,光照时长14小时/天, pH5.4。
2 结果与分析
2.1 初代诱导培养
蝴蝶兰花梗接种到诱导培养基上,生长1周后在花梗的基部有褐色物质产生,腋芽开始萌动,1月后腋芽可以长到1.5厘米高,出芽率可达50%。
2.2 继代增殖培养
将长出的芽选取约1.5厘米的苗,取出后切去叶片和基部褐化部分,转接到增殖培养基中40天后,增殖倍数可达到3倍以上。
2.3 生根培养
将高约2厘米的蝴蝶兰试管苗接种到生根培养基中,50天后,全部生根,平均生根3.5条,长2.5厘米。
2.4 壮苗培养及驯化移栽
壮苗:将生根组培苗转接到壮苗培养基,培养15天后移栽。
驯化:室内开瓶炼苗3天以上,室外炼苗3天。
移栽基质:最适合的栽培基质为水苔,椰糠也是良好的移栽基质。
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