捕蝇草(Dionaea muscipula Ellis)是茅膏菜科捕蝇草属食虫植物,是一种特化程度很高的食虫植物,具有较高的观赏价值和科普教育意义。
本试验利用其花序轴进行组织培养,以期为捕蝇草的大量繁殖和栽培提供依据。
1 材料与方法
1.1 外植体材料及培养条件
1.1.1 外植体选择
幼嫩花序轴。
1.1.2 外植体预处理及灭菌
幼嫩花序轴用自来水冲洗1小时,吸水纸吸去水分后在70%酒精中漂洗1分钟,然后用 0.1%升汞消毒5分钟,无菌水清洗6-7次,在无菌条件下切去两端,中间部分切成5毫米长的小段,接种在诱导培养基上。
1.1.3 培养条件
诱导培养基:1/2MS + NAA 0.1mg/L + 6-BA 1.0mg/L
增殖培养基:1/2MS + NAA 0.1mg/L + 6-BA 0.1mg/L
生根培养基:1/2MS + NAA 0.1mg/L + 6-BA 5.0mg/L
以上培养基均加蔗糖3% ,琼脂0.7%,pH值5.8。
培养温度为22-24℃,光照强度为1500lx,光照时长为14时/天。
2 结果与分析
2.1 初代诱导培养
花序轴切段接种7天后,可以看到切口边缘增厚膨大;10-15天膨大部分变为红色,并有颗粒状的不定芽产生;20-25天突起不定芽增大到直径3毫米左右;在随后的培养过程中,芽体逐渐由红色转为绿色,并抽生出叶片,生长成丛生芽状态。
2.2 继代增殖培养
花序轴切段培养50天后,不定芽生长成丛生状,叶片长1-1.5厘米,在无菌条件下将不定芽分开并转移到继代培养基上,继代周期30天。
2.3 生根培养
将继代培养获得的丛生状小植株切开,每个个体保留5-6枚叶片,切去残留的老根,整理株型后接种在生根培养基上。10天后见新根长出,25天后可获得根系发育良好的健壮幼苗。
2.4 炼苗和移栽
移栽前先打开三角瓶封口炼苗5天后出瓶,洗净琼脂移栽到育苗盘中。移栽基质使用消毒过的泥炭土,pH值4-5。在移栽后的第一周应盖上玻璃板以保持湿度,每10天喷施1次杀菌剂。成活率可达90%。
3 讨论
国外报道的捕蝇草组织培养实验都是以种子或叶片为初始诱导材料,通过对照实验作者发现种子在培养基中很难吸涨萌发,而叶片经升汞消毒后褐变严重。
以花序轴作为外植体进行诱导,具有以下优点:1 取材容易,污染少,便于消毒;2.容易诱导不定芽。
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