观赏凤梨(Bromeliads)是凤梨科可供栽培的多年生常绿草本植物,是名优高档切花和盆栽花卉。
本试验利用花蕾作为外植体建立了3种观赏凤梨的离体快繁体系,为凤梨科植物工厂化生产提供了新的技术支持。
1 材料与方法
1.1 外植体材料及培养条件
1.1.1 外植体选择
花蕾。
1.1.2 外植体预处理及灭菌
剪取的花蕾置于流水下冲洗2小时,再在无菌条件下,用70%酒精浸泡20秒,0.03%的升汞消毒8分钟,然后用无菌水冲洗5次,最后将消毒好的材料置于滤纸上吸干水分。剥去花蕾的花苞片,切取饱满的小花蕾直接接种或横切后接种到培养基上。
1.1.3 培养条件
诱导培养基:MS + 6-BA 3.0mg/L + ZT 1.5mg/L + NAA 0.5mg/L
增殖培养基:MS + 6-BA 1.0mg/L + NAA 0.1mg/L
生根培养基:1/2MS + IBA 0.3mg/L + NAA 0.2mg/L + AC 0.5g/L
以上培养基均加蔗糖3% ,琼脂0.7%,pH值5.6-5.8。
培养温度为22-25℃,光照强度为1000-1500lx,光照时长为12时/天。
2 结果与分析
2.1 不定芽诱导培养
外植体接种于诱导培养基上,2天后花蕾基部逐渐转绿,75天后在花的基部直接分化出3-5个绿色芽点,继续培养形成不定芽。
2.2 继代增殖培养
当诱导出的不定芽长至0.5厘米以上时,将其切割成双芽簇接种在增殖培养基上,20天后在芽苗基部分化出丛芽,从而以芽丛的方式进行增殖,36天为一个周期。
2.3 生根培养
当增殖培养基中的无根苗长至2厘米以上时,将其剪切成单苗接种到生根培养基中,14天后苗基部分化出根原基,18天左右长出3-4条0.4厘米长的根,从而成为完整植株。
2.4 炼苗与移栽
选择根长0.4厘米以上的试管生根苗进行驯化移栽。
试管苗移栽前先移在温室内放置5-7天。然后取出,洗去基部培养基,移栽到事先消过毒的基质(草炭:蛭石:珍珠岩 = 3:1:1)内。
移栽前期,将其置于拱棚内,温度保持在23-25℃,湿度在80%以上。1个月后小苗在基质中长出白色新根,成活率99%。
3 讨论
关于观赏凤梨的组培报道中主要以顶芽、侧芽及短缩茎作为外植,本试验以花蕾为外植体,在组培诱导过程中有效地降低了污染、避免了褐化,并在不伤害母株的前提下科学取材,提高厂诱导率。
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