白芨[Bletillastriata(Thunb.)Reichb.f.]为兰科白芨属多年生草本植物。白芨不仅具有较高观赏价值,亦是我国常用的中药材之一,以干燥块茎入药,具有收敛止血、消肿生肌等功效。
目前白芨多以种子作为外植体进行组培,本试验通过以白芨侧芽作为外植体对白芨再生体系进行研究,探讨适宜的培养基,为其快速繁殖提供参考。
1 材料与方法
1.1 外植体材料及培养条件
1.1.1 外植体选择
将白芨块茎在室内进行沙培,以其萌发侧芽为外植体进行培养。
1.1.2 外植体预处理及灭菌
用清水洗净侧芽上的污物,再用洗衣粉溶液浸20分钟,清水冲洗后在超净工作台上,用75%酒精浸泡30秒,再用0.2%升汞溶液灭菌8分钟, 然后用无菌水冲洗5-6次,切去侧芽底端形成新的伤口,接到培养基上。
1.1.3 培养条件
培养温度为25-28℃,光照强度为1500-2000lx,光照时间12小时/天。
2 结果与分析
2.1 初代诱导培养
将处理好的侧芽接种在诱导培养基上(配方见文末,下同),培养25天可形成丛生芽。
2.2 继代增殖培养
当初代诱导丛生芽长到1-2厘米左右时,将其切分成单芽,接种到增殖培养基中进行培养,15天后在节间处出现一个个小突起,30天后长成丛生芽。
2.3 生根培养
当丛生芽长到3-4厘米时,将其切成单芽接种于生根培养基中进行生根诱导培养,培养40天。
2.4 炼苗移栽
当白芨组培苗在生根培养基上长有3条以上根时,将瓶苗置于室内炼苗5天,再打开瓶盖继续炼苗2天,然后将小苗从培养瓶中取出,洗去粘附在根部的培养基,假植到沙床中3个月,再移栽到大田,成活率87.5%。
附配方
诱导培养基:MS + 1.5 mg/L 6-BA + 0.1mg/L NAA
增殖培养基:MS + 2.0 mg/L 6-BA + 0.2mg/L NAA
生根培养基:1/2MS + 1.0mg/L NAA + 0.1mg/L 6-BA
以上配方均含2%蔗糖和0.5%琼脂,pH值6.2。
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